加替沙星殼聚糖納米粒子的制備、體外性質(zhì)研究及眼表毒性實(shí)驗(yàn).pdf

1、目的：制備一種新型的眼表制劑--加替沙星殼聚糖納米粒子,初步研究其體外性質(zhì)及眼表毒性,為研發(fā)新型眼表緩釋制劑提供新的思路,為納米藥物的眼表應(yīng)用提供相關(guān)前期實(shí)驗(yàn)依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)分為三部分：實(shí)驗(yàn)一:離子交聯(lián)法制備加替沙星殼聚糖納米粒子；實(shí)驗(yàn)二:加替沙星殼聚糖納米粒子混懸液的體外性質(zhì)研究；實(shí)驗(yàn)三:加替沙星殼聚糖納米粒子混懸液的兔眼表毒性實(shí)驗(yàn)。
　　 方法：實(shí)驗(yàn)一：采用離子交聯(lián)法制備加替沙星殼聚糖納米粒子混懸液,用正交試驗(yàn)法對影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的

2、三個(gè)主要因素進(jìn)行優(yōu)選(殼聚糖、多聚磷酸鈉、加替沙星原料藥三者的濃度),選擇四個(gè)納米粒子混懸液的主要技術(shù)參數(shù)作為考察指標(biāo)(納米粒子粒徑,Zeta電位,載藥量,包封率)。實(shí)驗(yàn)二：按照實(shí)驗(yàn)一的方法,制備9組加替沙星殼聚糖納米粒子混懸液。每一組分別對其性質(zhì)進(jìn)行檢測:透射電鏡檢測其形態(tài),激光粒徑分析儀檢測其平均粒徑及Zeta電位,高效液相色譜法檢測其載藥量及包封率。通過方差分析,選定實(shí)驗(yàn)組3作為優(yōu)選組。實(shí)驗(yàn)三：按照實(shí)驗(yàn)一的方法采用實(shí)驗(yàn)組3的濃度配

3、比制備加替沙星殼聚糖納米粒子混懸液。雌性新西蘭大白兔5只,右眼為實(shí)驗(yàn)眼,左眼為對照眼,實(shí)驗(yàn)眼予30μL3.0 mg/mL加替沙星殼聚糖納米粒子混懸液滴眼,每30分鐘一次,達(dá)到6小時(shí)。對照眼在相同時(shí)間滴入生理鹽水。根據(jù)經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織(Organization for EconomicCooperation and Development,OECD)在1987年制定的眼表刺激性實(shí)驗(yàn)評分系統(tǒng),對實(shí)驗(yàn)眼及對照眼在首次滴入后的3、6、24小時(shí)

4、進(jìn)行評分。評分后將實(shí)驗(yàn)兔深麻醉后采用空氣栓塞法處死,分別取兔眼角膜、結(jié)膜及眼瞼組織固定,行組織病理學(xué)檢測及超微結(jié)構(gòu)學(xué)檢測,觀察實(shí)驗(yàn)眼及對照眼的形態(tài)學(xué)有無差異。
　　 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)一：采用離子交聯(lián)法制備出了不同濃度的淡藍(lán)色乳光懸液,懸液既不完全澄清,也不產(chǎn)生沉淀,Tyndall實(shí)驗(yàn)陽性。實(shí)驗(yàn)二：通過正交試驗(yàn)優(yōu)選組的濃度配比如下:殼聚糖0.10(％w/v)、多聚磷酸鈉0.10(％w/v)、加替沙星0.15(％w/v)。透射電鏡下顯示為

5、形態(tài)規(guī)則的球形結(jié)構(gòu)。對混懸液的性質(zhì)檢測如下:平均粒徑232nm,Zeta電位32mV,包封率67.04％,載藥量11％。實(shí)驗(yàn)三：在首次滴入混懸液后的24小時(shí),實(shí)驗(yàn)眼臨床評分為1,對照眼評分為0。實(shí)驗(yàn)眼及對照眼的角膜、結(jié)膜及眼瞼組織行光鏡及電鏡檢測顯示均無炎癥反應(yīng)表現(xiàn)。
　　 結(jié)論：⑴離子交聯(lián)法是一種簡便、重復(fù)性好的制備納米粒子混懸液的方法；丁達(dá)爾現(xiàn)象能鑒別混懸液與溶液。⑵采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)的方法能優(yōu)選出質(zhì)量指標(biāo)最佳的濃度配比,通過