蘇丹紅Ⅰ對大鼠肝細(xì)胞的影響.pdf

1、蘇丹紅1號（1-phenylazo-2-hydroxynaphthol，SudanⅠ）是一種人工合成的脂溶性偶氮化合物，廣泛地應(yīng)用于各種工業(yè)生產(chǎn)。由于其對人體健康具有潛在危險性，被禁止作為食品添加劑使用，但在我國和歐美市場上發(fā)現(xiàn)了含蘇丹紅的食品，引起了普遍關(guān)注。 早在1975年，國際癌癥研究機(jī)構(gòu)（InternationalAgencyforResearch on Cancer IARC）就將蘇丹紅1號歸為第三類致癌物。研究發(fā)現(xiàn)，

2、用體內(nèi)、體外遺傳毒性試驗檢測蘇丹紅1號的遺傳毒性，其結(jié)果大多顯示陽性。蘇丹紅1號通過多種途徑代謝，在其代謝過程中產(chǎn)生活性氧（ROS），其作用的靶器官是肝臟。受此啟發(fā)，我們試探討蘇丹紅1號產(chǎn)生遺傳毒性，是否與活性氧引起的氧化性DNA損傷有關(guān)。并且本研究選用大鼠肝臟細(xì)胞，它不僅是蘇丹紅1號作用的靶器官細(xì)胞，還保留了正常肝實質(zhì)細(xì)胞的許多功能，是檢測外來化合物遺傳毒性的理想細(xì)胞系。已有的研究表明，SudanⅠ可通過多種途徑進(jìn)入生物體內(nèi)，對許多器

3、官和組織包括肝臟、腎臟、肺組織、心臟以及生殖器官造成損傷，并引發(fā)多種疾病。SudanⅠ在動物與人體內(nèi)的代謝復(fù)雜，生物毒性不易監(jiān)測，并具有多樣性的特點，因此，SudanⅠ的毒性及分子機(jī)制目前還不清楚。本研究以大鼠肝臟細(xì)胞為研究對象，通過單細(xì)胞凝膠電泳實驗，DPC檢測實驗和MDA檢測等實驗，研究了SudanⅠ的遺傳毒性作用，并對其可能的分子機(jī)制蘇丹紅1號進(jìn)行了討論。研究結(jié)果如下： 1.SudanⅠ導(dǎo)致DNA分子斷裂 Sud

4、anⅠ能否導(dǎo)致DNA分子斷裂，學(xué)界一直沒能達(dá)成共識。本研究以運用單細(xì)胞凝膠電泳技術(shù)檢測SudanⅠ對大鼠肝臟細(xì)胞DNA的損傷作用。結(jié)果表明，SudanⅠ可引起大鼠DNA的損傷，并且隨著SudanⅠ濃度的逐漸增高，DNA的損傷也隨之加重，它們之間具有相應(yīng)的劑量效應(yīng)關(guān)系。所有SudanⅠ染毒濃度組（25μmol/L，50μmol/L and100μmol/L）均能導(dǎo)致大鼠肝臟細(xì)胞的DNA斷裂，并且具有極顯著性（p<0.01）。 2.

5、SudanⅠ導(dǎo)致DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)效應(yīng) 在正常細(xì)胞中存在著一定量的DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)（DNA-protein crosslinks，DPC）。這是DNA與核蛋白的正常聯(lián)系或其代謝的結(jié)果，對維持細(xì)胞的正?；顒泳哂兄匾饔?。當(dāng)有外來物理、化學(xué)因素作用時，則可誘導(dǎo)出過量的DPC。DPC與其他DNA損傷相比，較難修復(fù)，DPC僅發(fā)生在單鏈DNA上，表明這種交聯(lián)只能發(fā)生在DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄期間，因此DPC的形成，必將對DNA的構(gòu)象和功能（復(fù)制

6、與轉(zhuǎn)錄）產(chǎn)生嚴(yán)重的影響，并在其復(fù)制過程中容易造成某些重要基因（如抑癌基因）的丟失，導(dǎo)致腫瘤或某些嚴(yán)重疾病的發(fā)生。可見DPC過度增加是一種病理現(xiàn)象，是DNA分子的一種嚴(yán)重的遺傳損傷。 本研究以大鼠肝臟細(xì)胞為材料，采用SDS-KC1沉淀法對SudanⅠ致DPC效應(yīng)進(jìn)行了研究，研究證實了SudanⅠ可誘導(dǎo)大鼠肝細(xì)胞細(xì)胞產(chǎn)生DPC，DPC趨勢隨染毒濃度升高不斷升高。 3.SudanⅠ導(dǎo)致的大鼠肝臟細(xì)胞的脂質(zhì)過氧化作用 在