血紅素氧化酶-1與冠心病關聯(lián)研究.pdf

1、背景：血紅素氧化酶-1(HO-1)屬應激蛋白，催化血紅素分解為一氧化碳、膽紅素和鐵蛋白，通過抗氧化應激，擴張血管，抑制血管中膜平滑肌增生，抗內(nèi)皮細胞凋亡等發(fā)揮血管保護作用。HO-1 基因啟動子(GT)n 短串聯(lián)重復序列(STR)多態(tài)性與-413 A/T 位點單核苷酸多態(tài)性(SNP)能影響HO-1 轉(zhuǎn)錄，在缺氧條件下，啟動子區(qū)與缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)結(jié)合后對HO-1 的轉(zhuǎn)錄進行調(diào)控。HO-1 及HIF-1α屬于細胞內(nèi)“短命”蛋

2、白，主要通過泛素-蛋白酶系統(tǒng)降解滅活。冠心病(CAD)是威脅人類健康的重大疾病，氧化應激貫穿冠狀動脈粥樣硬化斑塊的形成、發(fā)展及斑塊破裂觸發(fā)臨床事件的始終，而有關HO-1 及泛素/HIF-1α/HO-1 通路抗氧化作用在冠心病發(fā)生、發(fā)展中的作用尚未闡明。
　　 目的在前期研究發(fā)現(xiàn)HO-1 蛋白表達與冠心病病情嚴重性相關的基礎上，評價HIF-1α和泛素對冠心病患者HO-1 表達水平的調(diào)控作用，探討HO-1 基因啟動子區(qū)STR 與－4

3、13 A/T 位點SNP 多態(tài)性與冠心病易感性、臨床多樣性的關聯(lián)，為HO-1 應用于冠心病的預防和治療提供新的思路。
　　 方法：選擇經(jīng)冠脈造影和臨床表現(xiàn)確診為急性心肌梗死(AMI)，不穩(wěn)定型心絞痛(UAP)，穩(wěn)定心絞痛(AP)冠心病患者共200 例為病例組(其中118 例使用抗氧化劑治療)，冠脈無明顯狹窄、年齡、性別與病例組相仿的100 例個體為對照。Western-blot 及RT-PCR檢測試驗對象外周血單個核細胞泛素、H

4、IF-1α、HO-1 蛋白表達及mRNA 轉(zhuǎn)錄水平；采用熒光標記PCR 和毛細管電泳相結(jié)合技術檢測HO-1 啟動子區(qū)STR，直接測序方法檢測-413 A/T SNP 基因型。
　　 結(jié)果：泛素、HIF-1α、HO-1 蛋白表達水平均隨冠心病病情加重而升高，HO-1 和HIF-1α、HO-1 和泛素蛋白表達水平均呈正相關(r1=0.73，r2=0.86)；與未使用抗氧化劑治療患者相比，使用抗氧化劑治療患者HO-1，HIF-1α蛋白

5、表達水平明顯升高(P1<0.01，P2<0.05)。HO-1 和泛素mRNA 轉(zhuǎn)錄水平與冠心病嚴重性有關(P<0.05)，而HIF-1αmRNA 表達水平卻無明顯差異。HO-1 基因啟動子區(qū)(GT)n 重復次數(shù)在16-39 之間，重復次數(shù)與HO-1 蛋白表達量密切相關，重復大于29 次的個體HO-1 表達量明顯減少（P<0.01），(GT)n STR 因此分為L(n≥30) 和S(n≤29) 2 種等位基因，S/S、S/L、L/L 三種

6、基因型。攜帶L 等位基因(L/L+L/S 基因型) 患者冠心病患病風險明顯增加(校正后OR=1.83，95％CI=1.04-3.24)，分層分析后發(fā)現(xiàn)攜帶L 等位基因(S/L+L/L基因型) 的吸煙個體冠心病的發(fā)病風險增加更顯著( 校正后OR=2.59 ，95％CI=1.16-5.80)；－413 A/T 在研究人群為SNP 位點，攜帶TT 基因型的血脂異常患者冠心病患病風險明顯減少(校正后OR=0.179，95％CI=0.05-0.6