樺褐孔菌人工培養(yǎng)條件研究.pdf

1、樺褐孔菌(Inonotusobliquus(Fr.)Pilat)，是珍稀的大型藥用真菌，在俄羅斯已有一百多年的應(yīng)用歷史，能治療多種疾病.目前美國(guó)、韓國(guó)及日本正加大對(duì)這種菌的研究，而我國(guó)尚處于初級(jí)研究階段。自美國(guó)的HumfeldH等對(duì)蘑菇的深層發(fā)酵進(jìn)行了研究，并提出用發(fā)酵法來(lái)培養(yǎng)蘑菇的菌絲體后，研究者們紛紛用這種方法進(jìn)行多種菌類的發(fā)酵。而國(guó)內(nèi)外對(duì)樺褐孔菌的深層發(fā)酵研究甚少，國(guó)內(nèi)目前僅有幾篇生物量方面的報(bào)道。對(duì)于其化學(xué)成分分析、調(diào)控及藥理學(xué)

2、方面的研究尚屬空白.
　　 本文以開(kāi)發(fā)利用樺褐孔菌這一新興的藥用菌物資源，探明其菌絲體生長(zhǎng)所需條件（環(huán)境條件、營(yíng)養(yǎng)條件）為目的，對(duì)樺褐孔菌的主要生物學(xué)特性進(jìn)行測(cè)定，以正交試驗(yàn)確定了樺褐孔菌菌絲體生長(zhǎng)所需的最適培養(yǎng)基，為樺褐孔菌的活性成分研究、開(kāi)發(fā)新藥及人工栽培樺褐孔菌子實(shí)體提供了科學(xué)依據(jù)。主要結(jié)果如下
　　 1樺褐孔菌菌絲體純培養(yǎng)條件研究
　　 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及環(huán)境條件的好壞決定藥用真菌菌絲的生長(zhǎng)和子實(shí)體的形成，對(duì)菌種

3、的分離成敗、種質(zhì)資源的保存時(shí)間長(zhǎng)短、質(zhì)量，各級(jí)菌種的生產(chǎn)至關(guān)重要，因此，藥用真菌純培養(yǎng)條件的研究為藥用真菌培養(yǎng)基和培養(yǎng)料的科學(xué)制備提供了科學(xué)依據(jù).通過(guò)樺褐孔菌菌絲體純培養(yǎng)篩選試驗(yàn)確定:最適碳源為葡萄糖，最適氮源為豆粉，最適碳氮比為30∶1，最適無(wú)機(jī)鹽為KH2PO4，最適pH為6-7，最適溫度為25℃，最適光照為黑暗，最適含水量為70％.單因子正交試驗(yàn)篩選出適宜樺褐孔菌菌絲體生長(zhǎng)的培養(yǎng)基為:1％的葡萄糖，0.9％豆粉，0.05％硫酸鎂和0

4、.01％磷酸二氫鉀。
　　 2樺褐孔菌菌絲體液體培養(yǎng)條件研究
　　 通過(guò)樺褐孔菌菌絲體液提培養(yǎng)篩選試驗(yàn)確定:最適碳源為葡萄糖，最適氮源為蛋白胨，最適碳氮比為60-70∶1，最適無(wú)機(jī)鹽為KH2PO4，最適pH為6-7，最適裝瓶量為500ml三角瓶裝液量為150ml，最適接種量為2.5％。單因子正交試驗(yàn)篩選出適宜樺褐孔菌菌絲體生長(zhǎng)的培養(yǎng)基為:4％的葡萄糖，0.4％蛋白胨，0.00％硫酸鎂和0.2％磷酸二氫鉀。
　　

5、3樺褐孔菌發(fā)酵液不同處理多糖的測(cè)定
　　 苯酚-硫酸法測(cè)定結(jié)果顯示，酒精倍數(shù)在1到4之間隨著倍數(shù)的增大測(cè)得糖含量普遍增大，4倍之后糖含量普遍下降.回收率101％;蒽酮-比色法結(jié)果顯示，糖含量變化趨勢(shì)與苯酚-硫酸法基本相似，但回收率過(guò)高;斐林滴定法靈敏度不高，測(cè)得的糖含量較低，回收率也較低。三種方法比較而言，苯酚-硫酸法與蒽酮-比色法測(cè)得的糖含量相差甚微，但是苯酚-硫酸法顯色不穩(wěn)定，蒽酮-比色法比較容易操作，最終確定最佳方法是蒽酮