脫氫表雄酮對氧化低密度脂蛋白誘導(dǎo)的血管平滑肌細胞中VCAM-1和MCP-1表達的影響.pdf

1、目的：本文通過觀察脫氫表雄酮(DHEA)對氧化低密度脂蛋白誘導(dǎo)的血管平滑肌細胞中VCAM-1及MCP-1表達的影響，來研究脫氫表雄酮在動脈粥樣硬化中的作用，從而探討其抗動脈粥樣硬化的可能機制。 方法：取4～6周齡雄性SpragueDawley(SD)大鼠，進行血管平滑肌細胞的原代培養(yǎng)，當(dāng)細胞純度達95％以上，取第3～4代細胞用于實驗。按實驗設(shè)計將培養(yǎng)細胞分為4個組：(1)正常對照組(2)ox-LDL刺激組(3)ox-LDL+DH

2、EA組(4)DHEA組。用免疫細胞化學(xué)和免疫蛋白印跡(Westernblot)的方法觀察并檢測各組VCAM-1蛋白的表達情況；采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測其VCAM-1及MCP-1mRNA的表達情況。 結(jié)果：免疫細胞化學(xué)結(jié)果顯示，各組VSMC均有VCAM-1蛋白表達，與正常對照組相比，ox-LDL刺激組的VCAM-1蛋白表達明顯增強(P＜0.01)，表現(xiàn)為細胞著色明顯加深。同ox-LDL刺激組相比較，ox-LDL+

3、DHEA組VCAM-1的蛋白表達明顯受到抑制(P＜0.01)，表現(xiàn)為著色明顯變淺。單純加DHEA組與正常對照組相比較無顯著差異；Western-Blot結(jié)果顯示與免疫細胞化學(xué)結(jié)果相似，各組VSMC均有VCAM-1蛋白的表達，ox-LDL能明顯誘導(dǎo)VCAM-1蛋白的表達，表現(xiàn)為A值明顯增大，p＜0.01；而ox-LDL+DHEA組VCAM-1蛋白與ox-LDL刺激組相比明顯受到抑制，表現(xiàn)為A值明顯變小，p＜0.01；DHEA組與正常對照組

4、無明顯差別。在逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)中，根據(jù)電泳結(jié)果顯示，各組細胞均表達VCAM-1mRNA和MCP-1mRNA，ox-LDL組VSMC表達的VCAM-1和MCP-1mRNA明顯高于正常對照組(p＜0.01)，而同時加入DHEA后其mRNA表達則有下降(p＜0.05及p＜0.01)。單獨加DHEA組與正常對照組比較，VCAM-1和MCP-1mRNA表達與正常組mRNA無差異。 結(jié)論：ox-LDL能明顯誘導(dǎo)VSMC中VCAM-1及MC