桑斷枝爛葉病的病原菌種類鑒定.pdf

1、2011年廣西區(qū)內(nèi)較大范圍地發(fā)生一種新的桑樹病害，該病主要為害桑樹新長的嫩枝及葉片，染病的桑樹新枝出現(xiàn)灰褐斑而使枝條折斷、桑葉出現(xiàn)灰褐斑而穿孔破爛，因此朱方容等(2011)把該病稱之為“桑樹斷枝爛葉病”。
　　2014-2015年在廣西鳳山縣、東蘭縣主要桑產(chǎn)區(qū)進行桑斷枝爛葉病調(diào)查，發(fā)現(xiàn)該病害主要在云貴高原邊緣的石灰?guī)r地區(qū)發(fā)生，3～5月中旬高溫多雨，空氣不流通的條件下爆發(fā)，嚴重的會使桑農(nóng)因病害缺葉而無法飼養(yǎng)第一批蠶。
　　針對

2、自廣西河池市主要桑園采集、分離培養(yǎng)獲得8菌株（其中廣西蠶業(yè)技術(shù)推廣總站2011分離獲得菌株5株），進行單孢分離及赫氏法則驗證，發(fā)現(xiàn)8株菌株均可引起與田間相同的癥狀表現(xiàn)。選擇代表菌株FSX-FHC在9種不同培養(yǎng)基上培養(yǎng)，觀察其在不同培養(yǎng)基上的培養(yǎng)性狀及產(chǎn)孢情況，發(fā)現(xiàn)FSX-FHC菌株在不同培養(yǎng)基上菌落形態(tài)各不相同，在PDA培養(yǎng)基和麥芽膏瓊脂培養(yǎng)基上的菌落生長快，氣生菌絲發(fā)達;在PDA桑汁混合培養(yǎng)基和水瓊脂培養(yǎng)基上的菌落氣生菌絲不發(fā)達;在玉

3、米瓊脂培養(yǎng)基和胡蘿卜瓊脂培養(yǎng)基上的菌落生長慢，表面有分散細小的黑色小點;在燕麥培養(yǎng)基上黑暗培養(yǎng)培養(yǎng)7d會產(chǎn)生橘紅色色素使培養(yǎng)基呈橘紅色;在桑汁培養(yǎng)基和合成低營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)20～30 d會產(chǎn)生大量的黑褐色小點分生孢子器。分生孢子器球形或扁球形，大小(120～160)μm×(130～180)μm;分生孢子橢圓形、梨形或卵形，大小(3.0～7.5)μm×(1.5～3.0)μm，無色，單孢，偶有一個隔膜，內(nèi)常含有2個油球。同時測定其核糖體

4、DNA的內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(Internal transcribed spacer，ITS)、肌動蛋白(Actin，ACT)基因和微管蛋白(β-tubulin，TUB)基因的核苷酸序列，經(jīng)Blast分析，發(fā)現(xiàn)FSX-FHC菌株的ITS序列、ACT基因和TUB基因序列與Boeremia exigua var.linicola的ITS序列、ACT和TUB基因的同源序列的同源性分別為99％、100％和100％。結(jié)合病原菌的形態(tài)特征及ITS序列、AC