纈沙坦預(yù)處理對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的影響.pdf

1、背景與目的：
　　隨著心肌梗死溶栓療法、經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈內(nèi)血管成形術(shù)等血運(yùn)重建治療方法在臨床中不斷推廣及普及，心肌梗死患者急性期的死亡率明顯下降，但心肌缺血再灌注損傷是影響再灌注治療效果的關(guān)鍵因素。因此如何減輕再灌注對(duì)缺血心肌的損傷作用成為防治缺血再灌注損傷的新靶點(diǎn)。目前缺血再灌注損傷的發(fā)生機(jī)制尚未闡明，已有研究表明缺血再灌注損傷與自由基損傷作用、鈣超載、白細(xì)胞誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)、能量代謝障礙、細(xì)胞凋亡、微血管功能障礙等有關(guān)。自由基損傷可

2、能是造成缺血再灌注損傷的主要原因，自由基具有氧化作用，易與各種細(xì)胞結(jié)構(gòu)成分如膜磷脂、蛋白質(zhì)、核酸等發(fā)生氧化反應(yīng)。解偶聯(lián)蛋白(UCPS)是線粒體內(nèi)膜上的質(zhì)子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，能夠在線粒體自由基增多時(shí)轉(zhuǎn)運(yùn)質(zhì)子進(jìn)入線粒體內(nèi)膜，從而減輕自由基的氧化損傷作用。臨床研究表明血管緊張素受體拮抗劑氯沙坦能夠減少心肌梗死面積、室性心律失常，改善心肌重構(gòu)，改善心?；颊叩拈L(zhǎng)期預(yù)后，這些有益作用是否與其減少自由基損傷作用之間存在關(guān)聯(lián)，目前尚不清楚。因此本研究通過建立大

3、鼠缺血再灌注損傷模型，給予纈沙坦預(yù)處理，檢測(cè)心肌解偶聯(lián)蛋白2(UCP2)表達(dá)，檢測(cè)超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)濃度，探討纈沙坦可能對(duì)缺血再灌注心肌保護(hù)的機(jī)制，為藥物治療提供實(shí)驗(yàn)證據(jù)和理論研究。
　　資料與方法：
　　1.將45只體重為200-250g，6-8周齡，健康雄性成年清潔級(jí)SD大鼠，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為三組:假手術(shù)組（SH組，n=15）、缺血再灌注組（IR組，n=15)、纈沙坦預(yù)處理組(X組，n=1

4、5)。
　　2.將大鼠稱重后，10％水合氯醛溶液腹腔注射麻醉大鼠，給予呼吸機(jī)輔助呼吸，假手術(shù)組只穿線不結(jié)扎，缺血再灌注組和纈沙坦預(yù)處理組均結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支30min后，再解除結(jié)扎，再灌注120min。建立心肌缺血再灌注損傷模型。纈沙坦預(yù)處理組給予纈沙坦(30mg/kg)，1次/天，灌胃治療4周，其余二組給予等體積的生理鹽水。
　　3.建立心肌缺血再灌注損傷模型成功后，檢測(cè)心肌SOD活性和MDA濃度。
　　4.心肌組

5、織HE染色后，利用光學(xué)顯微鏡觀察心肌細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化。
　　5.在缺血再灌注組和纈沙坦預(yù)處理組從左心室取缺血再灌注區(qū)心肌組織，在假手術(shù)組取相應(yīng)的左心室區(qū)域，Western blot、RT-PCR法測(cè)定各組心肌組織中UCP2蛋白和mRNA的表達(dá)。
　　6.采用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。3組間丙二醛的含量，SOD活性，UCP2蛋白和mRNA表達(dá)的比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。各檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

6、
　　結(jié)果：
　　1.心肌組織形態(tài)學(xué)變化:SH組可見排列整齊呈束狀的心肌纖維，無(wú)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，無(wú)變性壞死;IR組可見充血、淤血，心肌纖維腫脹，心肌細(xì)胞排列紊亂，紅細(xì)胞和炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，可見心肌間質(zhì)水腫及局灶性壞死;X組心肌纖維輕度腫脹，心肌細(xì)胞排列較模型組整齊，心肌間質(zhì)可見少量的紅細(xì)胞和炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，間質(zhì)水腫較輕，壞死范圍較小。
　　2.丙二醛含量，缺血再灌注組、纈沙坦預(yù)處理組比假手術(shù)組均升高(P＜0.01)，纈沙坦預(yù)處

7、理組低于缺血再灌注組（P＜0.01），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。SOD活性，缺血再灌注組、纈沙坦預(yù)處理組比假手術(shù)組均減少(P＜0.01)，纈沙坦預(yù)處理組高于缺血再灌注組（P＜0.01），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。UCP2 mRNA的相對(duì)表達(dá)量，缺血再灌注組、纈沙坦預(yù)處理組比假手術(shù)組均升高(P＜0.01)，纈沙坦預(yù)處理組高于缺血再灌注組(P＜0.01))。UCP2蛋白的表達(dá)量，缺血再灌注組、纈沙坦預(yù)處理組比假手術(shù)組均升高(P＜0.01)，纈沙坦預(yù)處理