動態(tài)補償聲光掃描實現(xiàn)雙色成像的研究.pdf

1、用于生物學研究的光學成像方法，因其高分辨率和相對較低的成本長期受到生物學家的喜愛和關注。自動化的光學成像方法能以高精度獲取精細的三維結構圖，解放了生物學家的雙手，使得大體積的生物樣本成像不再因為頻繁的切片、成像、配準操作而占用大量的人力腦力。共聚焦熒光顯微光學切片斷層成像系統(tǒng)（confocal-fMOST）針對熒光標記的小鼠全腦進行三維精細數(shù)據(jù)獲取，可以獲得全腦范圍內的神經(jīng)元長程投射連接圖，為神經(jīng)生物學家研究大腦結構和功能提供了強有力的

2、工具。多色標記成像技術的發(fā)展和成熟使得生物學研究更加科學有效，但是當前的共聚焦熒光顯微光學切片斷層成像系統(tǒng)只能針對單一熒光標記的樣本進行數(shù)據(jù)獲取。由于使用基于衍射效應的聲光偏轉器，掃描的多色光束不能完全重合，因此多色的confocal-fMOST實現(xiàn)在技術上具有難度。
　　本文在共聚焦熒光顯微光學切片斷層成像系統(tǒng)的基礎上，進行成像系統(tǒng)的多色化研究，解決了聲光偏轉器在多色同時掃描時會存在的偏轉角度不一致問題，發(fā)展了基于聲光偏轉器的多

3、色激光束動態(tài)補償同步掃描方法，并運用于系統(tǒng)實現(xiàn)，使得共聚焦熒光顯微光學切片斷層成像系統(tǒng)可以對兩種顏色標記的生物樣本進行雙通道同時成像。
　　在此基礎上，本文也討論提出了使用轉盤實現(xiàn)多色共聚焦熒光顯微光學切片斷層成像系統(tǒng)的思路，提出了自動化多色成像系統(tǒng)可能的技術方案，并利用生物樣本證實其可行性。通過預實驗作者發(fā)現(xiàn)轉盤共聚焦可以對神經(jīng)元軸突進行分辨，根據(jù)應用的不同，本文認為進行亞微米級別的神經(jīng)突追蹤，使用轉盤實現(xiàn)自動化的三維多色熒光成