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1、以轉(zhuǎn)CryIAb/CryIAc基因水稻為材料,采用室內(nèi)離體葉片測(cè)定法和活體生物測(cè)定法研究了轉(zhuǎn)Bt基因水稻對(duì)稻縱卷葉螟低齡幼蟲的抗蟲效果。通過檢測(cè)轉(zhuǎn)Bt基因水稻對(duì)稻縱卷葉螟幼蟲中腸解毒酶和保護(hù)酶以及Bt毒蛋白在轉(zhuǎn)Bt基因水稻大田移植植株中的表達(dá)情況,研究了轉(zhuǎn)基因水稻對(duì)稻縱卷葉螟的殺蟲機(jī)理。獲得如下結(jié)果: 1、不同生育期轉(zhuǎn)Bt基因水稻主莖頂葉,對(duì)稻縱卷葉螟低齡幼蟲表現(xiàn)出了很強(qiáng)的抗蟲性。從苗期至灌漿期,取食轉(zhuǎn)基因水稻葉片的稻縱卷葉螟幼
2、蟲的校正死亡率均在90%以上,尤其在苗期和孕穗期高達(dá)93%以上。灌漿期到成熟期,其校正死亡率在70%左右。應(yīng)用活體單株測(cè)定法檢測(cè)結(jié)果表明,轉(zhuǎn)Bt基因水稻對(duì)稻縱卷葉螟表現(xiàn)高抗,在稻株上接入稻縱卷葉螟幼蟲后,均未出現(xiàn)任何卷葉或白葉,而對(duì)照組均出現(xiàn)了不同程度的卷葉或白葉;對(duì)稻縱卷葉螟幼蟲毒殺效果的室內(nèi)生物測(cè)定結(jié)果和活體單株抗蟲測(cè)定法的結(jié)果基本一致。 2、用轉(zhuǎn)Bt基因水稻處理稻縱卷葉螟幼蟲,分別飼喂4h、36h后,其體內(nèi)AChE活力分別
3、比對(duì)照增加了52.09%、128.51%,經(jīng)t檢驗(yàn)達(dá)極顯著水平(P<0.01)。但試驗(yàn)持續(xù)36~48h時(shí),AChE活性急劇下降,與非轉(zhuǎn)Bt稻株相比較差異不顯著。根據(jù)生物濃縮原理表明:隨著稻縱卷葉螟取食時(shí)間的延長(zhǎng),其體內(nèi)Bt毒蛋白累積增多,最終破壞了酶保護(hù)系統(tǒng)而導(dǎo)致害蟲死亡。 稻縱卷葉螟幼蟲取食轉(zhuǎn)基因水稻葉片后,前期其中腸SOD活力顯著上升,并且一直處于較高的水平,與此同時(shí)其中腸的CAT和POD活力低于對(duì)照組,其中以POD尤為明顯
4、,但中期則出現(xiàn)回升現(xiàn)象,后期上述兩種酶一致表現(xiàn)下降趨勢(shì),且顯著(P<0.05)低于對(duì)照組。 3、Bt殺蟲蛋白在轉(zhuǎn)基因水稻各部位中均有表達(dá)。不同水稻生育期及不同部位中Bt殺蟲蛋白的表達(dá)量有差異??偟内厔?shì)是生育前期的表達(dá)量較生育后期高。在時(shí)間上,主莖中的殺蟲蛋白在分蘗期最高,成熟期最低,但葉片中蛋白的表達(dá)在整個(gè)生育期比較穩(wěn)定。 4、稻縱卷葉螟幼蟲取食轉(zhuǎn)Bt基因水稻后,在其體內(nèi)及糞便中均能檢測(cè)到Bt毒蛋白。其中6h前,蟲體內(nèi)的
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