骨髓間充質干細胞自體移植治療缺血性心肌病的實驗研究.pdf

1、背景：由于再生能力有限，心肌梗死(MI)后存活的心肌細胞不能修復梗死區(qū)。目前，生物學治療缺血性心肌病是一種潛在的方法，但細胞移植和基因治療的聯合應用仍有爭議。本實驗在豬心梗模型上自體移植經5-氮胞苷(5-aza)體外誘導、轉化生長因子(pTGF-β3)基因體外轉染的骨髓間充質干細胞(MSCs)，探討移植的MSCs能否在梗死區(qū)存活、向心肌方向分化，以及梗死后心功能和心肌灌注是否得到改善，并探討其機理?！　〉谝徊糠重i心肌梗死模型的建立　

2、　目的經心導管用明膠海綿栓子栓塞豬的冠狀動脈左前降支(LAD)，建立心肌梗死的大動物模型。　　第二部分豬骨髓間充質干細胞(MSCs)的分離、培養(yǎng)及體外轉化為心肌樣細胞的實驗研究　　目的建立豬骨髓間充質干細胞體外培養(yǎng)及轉化為心肌樣細胞的方法，為細胞心肌成形術提供新材料。　　方法豬的骨髓MSCs分離純化后，流式細胞儀檢測細胞周期；用5-氮胞苷(5-aza)誘導后，用抗結蛋白(desmin)、肌球蛋白重鏈(MHC)、心肌特異性肌鈣蛋白I

3、(cTnI)、連接蛋白-43(Cx-43)進行免疫細胞化學染色鑒定?！　〉谌糠重i轉化生長因子(pTGF-β3)cDNA的克隆及其在心肌樣細胞中的表達　　目的克隆豬轉化生長因子(pTGF-β3)基因并體外轉染豬的心肌樣細胞，研究轉染細胞表達pTGF-β3的情況。　　第四部分豬骨髓MSCs自體移植治療心肌梗死的實驗研究　　目的在豬的心梗模型上研究自體移植的骨髓MSCs能否持續(xù)存活和向心肌分化并改善心功能，并探討MSCs和基因聯合應