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1、目的:探討結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)促進(jìn)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)誘導(dǎo)活化的肌纖維母細(xì)胞增殖作用及其分子機(jī)制。
方法:用TGF-β1預(yù)處理人胚肺成纖維細(xì)胞(HELF)48h,使細(xì)胞轉(zhuǎn)化為肌纖維母細(xì)胞,然后將預(yù)處理后的細(xì)胞分為對(duì)照組,CTGF刺激組,和PD98059干預(yù)組。以Western免疫印跡法檢測(cè)a-SMA蛋白水平,并通過(guò)MTT法檢測(cè)CTGF對(duì)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)誘導(dǎo)活化的肌纖維母細(xì)胞增殖作用。進(jìn)
2、一步實(shí)驗(yàn)分別于0min、15min、30min、60 min四個(gè)時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)p-ERK.1/2、ERK.1/2蛋白表達(dá)水平。
結(jié)果:CTGF刺激組a-SMA蛋白表達(dá)明顯高于對(duì)照組(P<0.01);用PD98059阻斷ERK-1/2磷酸化可以明顯抑制CTGF引起的a-SMA蛋白表達(dá)(P<0.05);CTGF刺激組細(xì)胞增殖明顯與對(duì)照組相比(P<0.01);用PD98059阻斷ERK-1/2磷酸化可以明顯抑制CTGF引起的細(xì)胞增殖
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