發(fā)酵產L-天冬氨酸的初步研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、L-天冬氨酸在醫(yī)藥工業(yè)、食品、農業(yè)和生化試劑等有廣泛用途。本文以代謝控制發(fā)酵理論為指導,重點對L-天冬氨酸產生菌進行搖瓶培養(yǎng)和發(fā)酵條件的初步優(yōu)化。主要研究內容結果如下:
   利用HPLC-ELSD法定量測定發(fā)酵液中L-天冬氨酸含量。色譜條件為:PrevailC18柱,0.06%HFBA水-乙腈溶液(80:20)為流動相,柱溫25℃,流速為0.9mL/min,EL,SD漂移管溫度110℃,氣體流量2.8 L,/min。L-天冬氨

2、酸在0.8-3.2mg/mL范圍內,線性回歸比非常顯著(R2=0.9968),平均回收率達到100.4%。該法簡便、快速、準確性高、重復性好,適合于L-天冬氨酸的定量分析。
   研究菌株的搖瓶分批發(fā)酵條件。應用正交設計實驗和單因素實驗得到種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基的配比,優(yōu)化后種子培養(yǎng)基為(g/L):玉米粉2.5,葡萄糖5,MgSO4.7H2O5,NaCl5,pH7.0~7.2,0.1MPa30min;優(yōu)化后發(fā)酵培養(yǎng)基為(g/L)

3、:水解麥麩60,MgSO4·7H2O4,K2HPO4·3H2O2.96。并對種子培養(yǎng)條件和發(fā)酵培養(yǎng)條件進行了研究,優(yōu)化后種子培養(yǎng)條件為:初始pH7.0~7.2,裝液量50mL/500mL三角瓶,搖瓶轉速為200r/min,培養(yǎng)溫度為32℃,種齡為16h。優(yōu)化搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)條件為:發(fā)酵培養(yǎng)基初始pH7.2,裝液量40 mL/500mL三角瓶,搖瓶轉速為200r/min,發(fā)酵溫度為32℃,接種量為3%。在優(yōu)化條件下,菌株搖瓶分批發(fā)酵72h,產

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