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文檔簡介
1、目的:應(yīng)用同位素標(biāo)記相對和絕對定量技術(shù)(iTRAQ)結(jié)合二維液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)(2D LC-MS/MS)篩選精索靜脈曲張(varicocele,VC)不育患者和正常生育男性差異表達(dá)蛋白,探討VC導(dǎo)致男性不育的可能分子機(jī)制。
方法:收集左側(cè)VC不育患者(II度或III度)精液標(biāo)本10份為實(shí)驗(yàn)組,正常生育男性精液標(biāo)本10份作對照組。精漿樣本iTRAQ標(biāo)記后(117標(biāo)記VC不育組,114標(biāo)記正常生育對照組)進(jìn)行2D LC-MS/
2、MS分析。采用Proteome Discoverer1.3軟件對質(zhì)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,差異表達(dá)蛋白上下調(diào)倍數(shù)≥1.3,P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。所得差異表達(dá)蛋白進(jìn)行生物信息學(xué)分析。
結(jié)果:共鑒定出1100種蛋白。相對于正常生育組,VC不育組差異表達(dá)蛋白共89個(gè),其中上調(diào)蛋白45個(gè),下調(diào)44個(gè)?;虮倔w論(Gene ontology,GO)分析表明,這些差異表達(dá)蛋白的生物學(xué)過程主要富集分布于:損傷反應(yīng)、防御反應(yīng)、炎性反應(yīng)、急性
3、炎性反應(yīng)、急性時(shí)相反應(yīng)。與精子發(fā)生及生殖相關(guān)蛋白共3個(gè),分別為:zona pellucida-binding protein1 isoform2 precursor,phosphoglycerate kinase2(PGK2),semenogelin-1 preproprotein。
結(jié)論:精索靜脈曲張對男性生育的影響可以通過精漿中蛋白的表達(dá)變化體現(xiàn)出來,這些差異蛋白參與的復(fù)雜的生物學(xué)過程如損傷反應(yīng)、炎性反應(yīng)等綜合作用導(dǎo)致了男
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