CysLT1基因敲除小鼠模型和H99-GFP菌株的制備以及CysLT1受體在小鼠腦微血管和海馬中的分布.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的：
　　1、制備CysLT1基因敲除小鼠模型及H99-GFP菌株；
　　2、研究小鼠感染隱球菌H99后CysLT1受體在腦微血管及海馬中的表達(dá)。
　　方法：
　　1、采用PCR，RT-PCR及Western-blot檢測(cè)鑒定CysLT1基因敲除小鼠；
　　2、基因槍轟擊技術(shù)制備H99-GFP隱球菌菌株；
　　3、采用小鼠氣管接種新生隱球菌H99建立實(shí)驗(yàn)性小鼠腦膜炎模型；
　　4、免疫組化及免

2、疫熒光方法檢測(cè)CysLT1受體在腦組織中的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1、本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的CysLT1基因敲除小鼠經(jīng)在核酸及蛋白水平上檢測(cè)鑒定，均不表達(dá)CysLT1受體；
　　2、帶有GFP的質(zhì)粒通過(guò)基因槍轟擊可整合入H99基因組內(nèi)，篩選出的H99菌株可高水平穩(wěn)定表達(dá)GFP；
　　3、接種隱球菌后的野生型小鼠與假手術(shù)組小鼠相比，C ysLT1受體在大腦皮層和海馬神經(jīng)元細(xì)胞中的表達(dá)明顯增加，尤其在腦微血管中的表達(dá)顯著升高

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