1064nm Nd-YAG激光治療甲真菌病的臨床療效觀察及抑菌試驗研究.pdf

1、前言：
　　甲真菌病是指甲床和甲板持續(xù)性的真菌感染，約占所有甲疾病的50％[1,2]。本病是成年人最常見的甲疾病，在人群中的發(fā)病率約為2-8％，且隨著年齡的增加發(fā)病率也在增加，60歲左右發(fā)病率增至14-28％[3]。本病的治療包括:系統(tǒng)用藥、外用藥物、外科手術(shù)治療及激光、光動力等治療手段。系統(tǒng)治療往往采用口服伊曲康唑、特比奈芬和氟康唑等抗真菌藥物，需要服用數(shù)月之久，治愈率約在40～80％左右[4-6]。系統(tǒng)治療的藥物因其肝腎毒性較

2、大往往引起不良反應(yīng)較多，同時長期應(yīng)用上述化學(xué)藥物治療存在耐藥性、經(jīng)濟負擔(dān)等問題。部分老年患者、免疫抑制患者如長期應(yīng)用糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑及HIV感染患者常受到限制。局部外用抗真菌藥物用于治療甲真菌病，盡管相對于系統(tǒng)性口服用藥可以避免全身給藥引起體內(nèi)藥物蓄積及毒副作用，相對來說要安全和便宜，但因藥物穿透能力有限，很難作用在甲床、甲母質(zhì)等真菌寄存位置，從而降低了外用藥物的有效率。手術(shù)拔甲治療往往由于損傷較大，恢復(fù)期長等原因限制了其在本病治

3、療中的應(yīng)用。上世紀80年代就有國內(nèi)外學(xué)者應(yīng)用連續(xù)性co2激光、He-Ne激光等治療甲真菌病，但由于其損失較大、恢復(fù)時間較長等原因而未能得到普及。2003年Mera1[7]和Tasar等報道Nd∶YAG激光照射可以顯著殺死白念珠菌。2008年Vural，E.[8]等發(fā)現(xiàn)紅色毛癬菌在Q開關(guān)532nm、Q開關(guān)及長脈寬1，064 nm Nd∶YAG激光局部照射后，體外真菌培養(yǎng)顯示菌落形成受到明顯抑制。2009年Kozarev[9]首次報道了無創(chuàng)

4、的長脈寬1064nm Nd∶YAG激光治療甲真菌病的臨床研究結(jié)果，此后引發(fā)了激光治療甲真菌病的研究熱潮。
　　目的：
　　評估0.3ms1064nm Nd∶YAG激光對甲真菌病的治療療效及安全性。觀察不同激光在不同能量下的離體抑真菌情況，并且在透射電鏡下觀察真菌在激光照射后超微結(jié)構(gòu)的改變。
　　材料與方法：
　　一、實驗對象
　　論文一:臨床收集36例甲真菌病患者，患病甲供103個。真菌鏡檢陽性并符合準入標

5、準者給予入組治療，其中男性12例，女性24例;年齡24-67歲，平均39.25歲;甲真菌病嚴重程度評分SCIO從6-15。
　　論文二:抑菌試驗用31株真菌，包括紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、白色念珠菌共三種真菌均來自于中國醫(yī)大一院皮膚科真菌室收集的甲真菌病患者甲屑的真菌培養(yǎng)菌株，經(jīng)過實驗室菌落形態(tài)、顯微鏡、生理學(xué)實驗、特殊培養(yǎng)基等方式分離鑒定。
　　二、實驗材料
　　棉蘭染色液沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(SDA)、沙氏葡萄糖液體

6、培養(yǎng)基科(SDB)、科馬嘉念珠菌顯色培養(yǎng)基(CHROMagar)、玉米吐溫-80培養(yǎng)基(CMA+Tw80)、溴甲酚紫乳固體葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(BCP-MSG)和尿素瓊脂培養(yǎng)基(Urea Agar)、乳酸酚、3％戊二醛等。
　　三、實驗方法
　　1、將臨床收集的36例受試者共103個指甲采用自身隨機對照方式分為兩組，一組激光治療次數(shù)為4次，另一組治療次數(shù)為6次。激光治療每周一次。在開始治療前、治療后的第三個月、第六個月回訪照相并

7、給予評分。
　　2、將臨床收集培養(yǎng)的三種甲真菌經(jīng)過菌落形態(tài)學(xué)、光學(xué)顯微鏡、生理學(xué)實驗、特殊培養(yǎng)等方法鑒定后，分別采用相同濃度接種于SDA后，24℃培養(yǎng)2-7天。各培養(yǎng)菌落分別采用0.3ms1064nm Nd∶YAG激光、Q開關(guān)Nd∶YAG激光、585nm PDL激光及Q開關(guān)694nm紅寶石激光的不同能量照射后，連續(xù)每天使用數(shù)顯游標卡尺測量菌落直徑。在照射前及照射后24小時候利用透射電子顯微鏡(TEM)觀察三種真菌在不同激光照射作用

8、下的超微結(jié)構(gòu)的變化。
　　四、統(tǒng)計學(xué)分析
　　統(tǒng)計學(xué)過程利用spss17.0軟件完成，統(tǒng)計學(xué)方法未加說明則為t檢驗，真菌抑菌試驗采用重復(fù)測量方差分析，p＜0.05即具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　一、0.3ms1064nm Nd∶YAG對甲真菌病的治療效果
　　1、0.3ms1064nm Nd∶YAG治療甲真菌病安全、有效，副作用較小。
　　2、0.3ms1064nm Nd∶YAG治療甲真菌病治療次

9、數(shù)在采用4次和6次之間療效無統(tǒng)計學(xué)差異。
　　二、四種激光對三種真菌的抑菌效果及超微結(jié)構(gòu)的改變
　　1、通過每日測量菌落直徑變化，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析比較，0.3ms1064nm Nd∶ YAG激光、Q開關(guān)1064nm Nd∶YAG激光及Q開關(guān)694nm紅寶石激光對紅色毛癬菌生長有明顯抑制作用(p＜0.05)。
　　2、各種激光對三種真菌的超微結(jié)構(gòu)都有一定影響，但0.3ms1064nm Nd∶YAG激光、Q開關(guān)1064nm N

10、d∶ YAG激光及Q開關(guān)694nm紅寶石激光對真菌超微結(jié)構(gòu)影響最大。真菌的細胞壁、細胞膜及細胞核改變最為明顯。
　　結(jié)論：
　　1、0.3ms Nd∶YAG對各型甲真菌病均有良好的治療效果，該方法安全性有效性均較好。本方法治療次數(shù)在采用4次和6次之間療效無統(tǒng)計學(xué)差異。
　　3、Q開關(guān)694nm紅寶石激光、0.3ms1064nm Nd∶YAG激光、Q開關(guān)1064nmNd∶ YAG激光對紅色毛癬菌的生長抑制作用較為明顯，T