辣椒疫霉菌RxLR效應分子誘導細胞死亡活性分析及互作靶標鑒定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、疫霉菌(Phytophthora capsici)隸屬卵菌門，在進化上與真菌相差甚遠，和藻類同屬于茸鞭生物界，盡管和其他真菌一樣呈絲狀生長，但是其致病機理與其他真菌差異顯著。疫霉菌可以分泌大量的效應因子，干擾植物的防衛(wèi)反應，促進病原菌的侵染和定殖。根據(jù)其在寄主植物中的定位不同，效應因子分為胞外和胞內(nèi)效應因子兩大類。其中胞內(nèi)效應因子又包含RxLR和CRN(Crinkler)兩大類。RxLR效應蛋白在結構上可分為:信號肽、氨基端RxLR-d

2、EER轉(zhuǎn)運結構域和羧基端功能結構域三部分。推測RxLR-dEER類蛋白能夠進入植物細胞內(nèi)，有毒性功能。盡管目前已經(jīng)表明效應因子在含有對應抗病蛋白的植物上引起過敏性細胞死亡，但是我們對于這些RxLR效應蛋白在感病植物上的作用及其機制還不清楚，其植物上的分子靶標也有待鑒定。
　　本研究利用辣椒疫霉菌作為卵菌的模式，克隆了15個在侵染階段表達量較高的RxLR基因，并將其分別構建到PVX病毒表達載體和酵母雙雜交表達載體pGBKT7，對辣椒

3、疫霉RxLR效應分子的細胞死亡誘導活性和作用機制進行分析。將獲得的PVX效應分子重組載體轉(zhuǎn)化根癌農(nóng)桿菌GV3101，并在模式植物本氏煙（Nicotianabenthamiana）上瞬時表達，測試其細胞死亡誘導活性，結果鑒定到RxLR242能夠引起煙草細胞死亡的效應基因，進一步分析表明該效應因子也可在普通煙（Nicotianatabacum）上誘導細胞死亡。將擬南芥抗病關鍵蛋白因子EDS1基因克隆到pGADT7載體，將其分別與克隆的15個

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