胰島素樣生長因子Ⅱ加入心臟停搏液對大鼠離體心臟保護作用的實驗研究.pdf

1、目的：
　　胰島素樣生長因子(Insulin-like growth factors，IGFs)系統(tǒng)由多種具有廣泛生物學功能的細胞增殖調控因子組成，包括胰島素(Insulin)、胰島素樣生長因子Ⅰ（Insulin-like growth factorⅠ，IGF-Ⅰ）和胰島素樣生長因子Ⅱ(Insulin-like growth factor Ⅱ，IGF-Ⅱ)三大類配體，除具有胰島素樣的生物學活性外，還能夠發(fā)揮多功能生長因子的作用促進

2、機體組織生長發(fā)育，并具有雙向調節(jié)作用，根據發(fā)揮生物學效應的通路不同既可促進細胞增殖、分化，也可抑制細胞凋亡。其中的IGF-Ⅱ可通過結合激活IGF-ⅠR起到抑制細胞凋亡的作用，也可在心臟復灌后發(fā)揮保護心肌細胞的作用。
　　在心臟移植手術中，心臟停跳保存時的細胞凋亡影響手術的效果，改進心臟保存液配方，減輕心肌細胞凋亡和保護心臟是目前的研究熱點之一。本實驗通過離體灌注大鼠心臟模型，研究St.Thomas'Ⅱ停搏液中添加IGF-Ⅱ對大鼠供

3、心保存的保護作用及其可能的作用機制。
　　方法：
　　16只SD大鼠隨機分為St.Thomas'Ⅱ(STH)停搏液組（對照組）和rh-IGF-Ⅱ+STH停搏液組（實驗組），每組8只，每1mlSTH含10ngrh-IGF-Ⅱ。麻醉后開胸取出心臟迅速連于Langendorff灌注裝置上，主動脈根部灌注37℃預溫、pH值為7.4、以95％的O2及5％CO2混合氣飽和的KHB緩沖液，將連有壓力傳感器的測壓管經過左心耳、左心房、左房室

4、瓣通入左心室，將傳感器與M6240B多道生理信號采集處理系統(tǒng)相連接，測定心室血流動力學指標。10分鐘后關閉主動脈灌注，開放左心房灌注管，轉入Neely左心做功，收集冠脈流出液5分鐘。對照組和實驗組分別用STH停搏液和rh-IGF-Ⅱ+STH停搏液作為心臟停跳液，待心臟停跳后分別放入STH液和rh-IGF-Ⅱ+STH液中4℃保存3小時。將心臟重新置于Langendorff灌注裝置上灌注，灌注條件與保存前保持一致。檢測保存前后血流動力學指標

5、，計算恢復率;測定冠脈流出液恢復率及其所含的心肌酶肌鈣蛋白Ⅰ(Cardiac TroponinⅠ，cTnI)的含量;取保存3小時后心臟左室前壁心肌組織，用熒光分析法檢測心肌組織中Caspase-3含量，用TUNEL法測定心肌細胞凋亡情況。
　　采用統(tǒng)計軟件包SPSS16.0進行統(tǒng)計學分析，結果用(x)±s表示，各組樣本均數之間采用單因素方差分析（One-way analysis of variance，One-way ANOVA）

6、，顯著性水準為p＜0.05。
　　結果：
　　與對照組相比:
　　1.實驗組各血流動力學指標左心室舒張壓、左心室收縮壓、左心室最大壓力變化速率、冠脈流出量恢復率較好，兩組比較，差異具有顯著性(p＜0.05);
　　2.實驗組冠脈流出液中cTnI含量0.32±0.03ng/ml，較之對照組0.37±0.02ng/ml明顯降低，兩組比較，差異顯著性明顯(p＜0.01);
　　3.實驗組心肌組織中Caspase-

7、3活性單位為0.45±0.02，較之對照組的0.52±0.04活性單位明顯減少，兩組比較，差異顯著性明顯(p＜0.01);
　　4.實驗組心肌細胞凋亡指數18.83±1.97％，較之對照組的凋亡指數22.35±2.90％減輕，兩組比較，差異具有顯著性(p＜0.05)。
　　結論：
　　在STH停搏液中加入胰島素樣生長因子Ⅱ，所保存心臟的血流動力學指標恢復較好，冠脈流量增加，減少心肌酶cTnI漏出，Caspase-3活性