A型肉毒素治療瘢痕疙瘩頑固性痛癢和預防瘢痕增生攣縮的可行性研究.pdf

1、研究目的：探索治療瘢痕疙瘩頑固性痛癢的新方法及局部應用A型肉毒素改善創(chuàng)面愈合質量和預防瘢痕增生的可行性。 研究方法： 1.經(jīng)多次常規(guī)激素治療后痛癢無明顯改善的瘢痕疙瘩患者27例，僅接受過激素治療。隨機單盲分組，BTA注射組(T組，12例)和得寶松注射組(C組，15例)。隨訪1次/月，記隨訪次數(shù)為n(n=0～6)。采用VAS量表評估痛癢癥狀的變化，記為V隨訪次數(shù)，統(tǒng)計分析V值，評價療效。療程結束后，切除部分患者(T組7例，

2、C組8例)瘢痕進行免疫組化檢測SP表達情況。 2.40只SD大鼠隨機分為C組(無注射，對照組)和T組(BTA注射組，2U/創(chuàng)面)。BTA預注射后l周，建立大鼠創(chuàng)傷模型。測量術后3d和7d的創(chuàng)面面積。分別在BTA預注射后第7天(術前)、術后3天、術后7天和術后14天時，收集兩組創(chuàng)面皮膚標本。real-timePCR檢測皮膚組織中SP、CGRP、TGF-β1和α-SMA的mRNA表達。免疫組化和圖像分析技術檢測上述4種物質免疫陽性染

3、色的積分吸光度A值。 3.18只日本大耳白兔，隨機分為瘢痕組(S組)和給藥組(T組)共12只以及空白組(B組)6只。建立兔耳增生性瘢痕模型，術后28天，收集標本，分別進行HE染色、real-time PCR、western-blot檢測和細胞培養(yǎng)。分別檢測瘢痕增生指數(shù)HI、標本中SP、TGF-β1和α-SMA的mRNA含量、膠原I、III和α-SMA的蛋白表達和成纖維細胞的細胞周期。 研究結果： 1.治療后，A型

4、肉毒素注射組(T組)各觀察點的VAS值逐步下降，至首次注射后6個月，V6下降了59.60％，痛癢癥狀得到明顯減輕。而得寶松注射組(C組)各觀察點的VAS值較VO無統(tǒng)計學差異。T組標本中SP的積分吸光度A值較C組顯著減少。 2.A型肉毒素預注射組(T組)各時相點SP、CGRP、TGF-β1和α-SMA的免疫組化吸光度A值均較未注射組(C組)，顯著降低。與C組相比，T組四種物質的mRNA表達在各時相點下均出現(xiàn)不同程度減少，且術后3天

5、時差異顯著。C、T組四種物質的蛋白表達隨時間變化的趨勢與各自的mRNA變化趨勢基本一致。 3.A型肉毒素注射組(T組)SP、TGF-β1和α-SMA的mRNA含量較瘢痕組(S組)顯著降低，但均高于空白組(B組)；三組的α-SMA/β-actin蛋白印跡密度比值組間比較有顯著差異，且S組>T組>B組；T組的膠原I、III蛋白表達和膠原I/III比值顯著低于S組。與S組相比，T組處于增殖期的細胞明顯減少，相應分布于靜止期G0-G1的

6、細胞明顯增多。 研究結論： 1.A型肉毒素注射能顯著減少瘢痕組織內(nèi)的SP含量，減輕瘢痕疙瘩的頑固性痛癢，且療效具有時間依賴性； 2.①局部皮下預注射A型肉毒素不影響創(chuàng)面愈合的時間和速度；②在mRNA和蛋白水平上，A型肉毒素可減少SP、CGRP、TGF-β1和α-SMA的表達，且術后3天是BTA抑制四種物質mRNA表達的主要時期，這一作用至少可以維持14天； 3.①創(chuàng)傷后即刻，局部應用A型肉毒素不影響兔耳創(chuàng)