環(huán)境溫度變化及LPS、ConA共刺激大鼠致脾臟免疫功能變化的形態(tài)學(xué)研究.pdf

1、目的：通過觀察環(huán)境溫度驟變及伴有LPS、ConA刺激時(shí)大鼠脾臟病理學(xué)變化和脾臟淋巴細(xì)胞亞群的數(shù)量變化，探討不同環(huán)境溫度下機(jī)體免疫功能變化的規(guī)律，為極端氣候下疾病防治提供理論依據(jù)。
　　 方法：根據(jù)不同溫度和是否LPS刺激和ConA刺激將144只9～15周齡雄性SD大鼠隨機(jī)分為常溫(20℃)對(duì)照組、常溫LPS刺激組、常溫ConA刺激組、4℃低溫刺激組、4℃LPS刺激組、4℃ConA刺激組、-12℃低溫刺激組、-12℃LPS刺激組、

2、-12℃ConA刺激組、37℃高溫刺激組、37℃LPS刺激組、37℃ConA刺激組共12組，每組12只大鼠。各組均觀察1h、8h、24h和168h4個(gè)時(shí)間點(diǎn)，每時(shí)間點(diǎn)3只大鼠。動(dòng)物在正常溫度20℃下穩(wěn)定飼養(yǎng)7天后，分別給予相應(yīng)組環(huán)境溫度變化和腹腔注射LPS(1mg/kg體重)、ConA(5mg/kg體重)。于各觀察時(shí)間點(diǎn)處死動(dòng)物，取脾臟組織以4％多聚甲醛液固定，石蠟包埋，常規(guī)HE染色和CD3+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞和CD20+B細(xì)胞免疫

3、組織化學(xué)染色，用體視學(xué)方法測(cè)算各組大鼠脾組織中CD3+T、細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞和CD20+B細(xì)胞的數(shù)密度。用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS17.0比較溫度刺激組內(nèi)各參數(shù)的差異和伴有LPS刺激或ConA刺激各組間參數(shù)的差異。
　　 結(jié)果：1.各單純溫度刺激組(4℃低溫刺激組、-12℃低溫刺激組、37℃高溫刺激組)大鼠脾臟均出現(xiàn)不同程度的病理學(xué)改變，主要表現(xiàn)在脾臟白髓萎縮，淋巴小結(jié)減少，動(dòng)脈周圍淋巴鞘及淋巴小結(jié)內(nèi)細(xì)胞數(shù)量及密度減少，分布稀疏，在-

4、12℃低溫刺激組表現(xiàn)最嚴(yán)重。單純LPS刺激組和單純ConA刺激組的組織學(xué)變化與正常對(duì)照組比較，動(dòng)脈周圍淋巴鞘變薄，單純LPS刺激組出現(xiàn)淋巴小結(jié)增多，生發(fā)中心明顯，細(xì)胞豐富；而單純ConA刺激組則出現(xiàn)淋巴小結(jié)變少及其細(xì)胞數(shù)量減少等情況。當(dāng)溫度變化同時(shí)伴有LPS刺激時(shí)，生發(fā)中心多見，但較單純溫度刺激時(shí)略有減少，動(dòng)脈周圍淋巴鞘顯著變薄，鞘內(nèi)細(xì)胞密度稀疏。當(dāng)溫度變化同時(shí)伴有ConA刺激時(shí)，動(dòng)脈周圍淋巴鞘輕度變薄，淋巴小結(jié)內(nèi)細(xì)胞密度稀疏。

5、　　 2.常溫對(duì)照組大鼠脾臟動(dòng)脈周圍淋巴鞘部位以CD3+、CD8+T細(xì)胞為主，淋巴小結(jié)內(nèi)以CD20+B細(xì)胞為主。邊緣區(qū)及紅髓分別散在上述這些細(xì)胞。
　　 3.各單純溫度刺激組CD3+、CD8+T淋巴細(xì)胞的數(shù)密度均低于常溫對(duì)照組，而CD20+B細(xì)胞的數(shù)密度則高于常溫對(duì)照組。
　　 4.單純LPS刺激組與單純ConA刺激組CD3+、CD8+T淋巴細(xì)胞的數(shù)密度均低于對(duì)照組，而CD20+B細(xì)胞的數(shù)密度則高于對(duì)照組。
　　

6、 5.溫度變化+LPS、ConA刺激時(shí)，各刺激組CD3+、CD8+T淋巴細(xì)胞的數(shù)密度均低于常溫+LPS、ConA刺激組，而CD20+B細(xì)胞的數(shù)密度則高于常溫+LPS、ConA刺激組。
　　 6.各溫度刺激對(duì)淋巴細(xì)胞影響程度不同。CD3+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞可受高、低溫影響而降低，以低溫影響更明顯，CD20+B細(xì)胞可受高、低溫影響而升高，則以4℃組最明顯。
　　 結(jié)論：1.環(huán)境溫度驟升或驟降都可引起脾臟病理學(xué)改變，出現(xiàn)

7、動(dòng)脈周圍淋巴鞘變薄，生發(fā)中心變少及淋巴小結(jié)數(shù)量減少。
　　 2.環(huán)境溫度驟升驟降都可引起脾臟淋巴細(xì)胞數(shù)量的變化，出現(xiàn)CD3+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞減少等細(xì)胞免疫抑制現(xiàn)象及CD20+B細(xì)胞升高等體液免疫增強(qiáng)現(xiàn)象。
　　 3.環(huán)境溫度驟變與LPS或ConA共刺激時(shí)脾組織中CD3+、CD8+T淋巴細(xì)胞的數(shù)密度進(jìn)一步降低而CD20+B細(xì)胞的數(shù)密度進(jìn)一步升高，也即細(xì)胞免疫進(jìn)一步抑制和體液免疫進(jìn)一步增強(qiáng)。ConA對(duì)機(jī)體的細(xì)胞免疫抑制