硒和沸石及其聯合對黃曲霉毒素B1暴露肉雞的保護作用.pdf

1、黃曲霉毒素中毒是畜禽養(yǎng)殖行業(yè)常見的問題，動物誤食含黃曲霉毒素的飼糧后會對生產性能和繁殖性能造成不良影響，且殘留在動物肌肉和組織中的毒素能夠進一步對人體產生損害作用。黃曲霉毒素引起機體損傷的原因之一是它能夠誘導細胞產生活性氧簇(ROS)，從而對機體產生氧化應激反應，當氧化應激作用超出機體所能承受的抗氧化能力時，便會造成損傷。沸石作為霉菌毒素吸附劑的應用早有研究，且其作用機制也已明確;硒(Selenium，Se)是機體必需的營養(yǎng)元素，也是一

2、種有效的抗氧化劑，作為許多抗氧化酶和Ⅱ相解毒酶的組成部分，它在抗氧化應激反應中起了重要作用，Se用于緩解霉菌毒素的研究報道也有許多，但其作用機制并不清楚。研究表明，Se缺乏時會誘導胞質Nrf2解耦連后入核，啟動其調控的下游Ⅱ相酶和抗氧化酶基因的表達，因而，我推測Se在黃曲霉毒素B1(AFB1)毒性效應緩解過程可能與Nrf2抗氧化通路相關。主要研究結果如下:
　　1.硒和沸石對AFB1暴露肉雞肝臟氧化損傷的保護作用
　　為了研

3、究Se和沸石對AFB1暴露肉雞肝臟氧化損傷的緩解作用。選取1日齡AA肉雞150只，隨機分為5個處理組:A.對照組（基礎飼糧），B.AFB1組（基礎飼糧+100μg/kg AFB1），C.沸石組（基礎飼糧+100μg/kg AFB1+3％沸石），D.Se組(基礎飼糧+100μg/kg AFB1+0.3 mg/kg Se)，E.沸石+Se組(基礎飼糧+100μg/kg AFB1+3％沸石+0.3 mg/kg Se)，試驗期為42 d。結果表

4、明:AFB1組與對照組相比，肉雞肝臟重顯著降低(P＜0.05)，平均日采食量和料重比有所升高，平均日增重略有降低;血清谷草轉氨酶(GOT，P＞0.05)和谷丙轉氨酶(GPT，P＜0.05)活性升高;肝臟丙二醛(MDA)和過氧化氫(H2O2)含量顯著升高(P＜0.05)，總超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽過氧物酶(GSH-Px)水平則顯著降低(P＜0.05);肝臟組織病理切片觀察到多處出血位點及肝細胞壞死和萎縮。

5、Se組與AFB1組相比，肉雞平均采食量和料重比有所降低(P＞0.05)，肝臟重則顯著增加(P＜0.05)，與對照組無顯著差異(P＞0.05);血清GOT和GPT活性減弱;肝臟GSH-Px和T-SOD活性顯著升高(P＜0.05)，MDA含量顯著降低(P＜0.05)，三者都恢復到對照組水平，H2O2含量有所減低;肝臟損傷得到緩解。與AFB1組相比，沸石組ADFI、ADG、F/G并未得到良好改善，但3％的沸石降低了肉雞的死淘率，顯著增加了肝臟

6、重(P＜0.05);Se與沸石聯合組ADG、F/G和死淘率得到一定改善(P＞0.05)，肝臟重也顯著增加(P＜0.05);沸石組、沸石+Se組GSH水平并無改善(P＞0.05)，但沸石+Se組GSH-Px和T-SOD活性顯著升高(P＜0.05)，恢復到了對照水平。沸石組和沸石+Se組的GOT、GPT活性得到一定降低(P＞0.05)，但并未恢復至對照水平，三組之間差異不顯著;肝臟損傷得到恢復。由此可見，Se和沸石能夠緩解AFB1引起的肉雞

7、肝臟氧化損傷，增加肉雞抗氧化能力，但Se和沸石聯系作用效果并不好于單獨使用時的效果。
　　2.硒和沸石及其聯合對AFB1暴露肉雞睪丸氧化損傷的保護作用
　　本試驗旨在研究Se和沸石對AFB1暴露肉雞睪丸氧化應激反應的緩解作用。試驗分組同上文。結果表明:AFB1、Se、沸石及其聯合對睪丸重和睪丸器官指數的影響差異并不顯著(P＞0.05)。飼糧添加AFB1能夠顯著降低CAT、GSH和GSH-Px的酶活性(P＜0.05)，同時增加

8、H2O2(P＞0.05)和MDA(P＜0.05)含量。與AFB1組相比，沸石組GSH水平恢復到對照組水平，沸石組、Se組和沸石+Se組的其他抗氧化指標有所改善，但差異并不顯著(P＞0.05)。對照組睪丸組織正常，AFB1組和沸石組睪丸略有萎縮;組織形態(tài)學切片結果顯示，對照組曲細精管形態(tài)完好，間質細胞和精原細胞細胞清晰，細胞核位于細胞中間，AFB1組曲細精管間的間隙有所增加，但并不明顯，其他各組的睪丸形態(tài)也較為正常。由此可見，Se和沸石能

9、夠緩解AFB1引起的肉雞睪丸氧化應激反應，從組織形態(tài)學看出，AFB1對睪丸并未產生實質性損傷。
　　3.硒對AFB1暴露肉雞肝臟和睪丸氧化損傷保護作用的可能機制
　　本試驗旨在研究Se在緩解AFB1毒性效應過程中，肝細胞和睪丸細胞內Nrf2和caspase-3表達的變化。選用1日齡AA肉雞90只，隨機分為3組:基礎飼糧（對照組），基礎飼糧+100μg/kg AFB1(AFB1組)，基礎飼糧+100μg/kg AFB1+0.3

10、 mg/kg Se（Se組），試驗期42 d。結果表明:免疫組化和蛋白印跡分析發(fā)現轉錄因子NF-E2相關因子2(Nrf2)蛋白在肉雞肝臟和睪丸細胞核內表達顯著增加(P＜0.05)，凋亡因子caspase-3只在AFB1組細胞的胞核內表達。在100μg/kg AFB1飼糧中加入0.3 mg/kg Se能使肝細胞胞核Nrf2表達水平顯著下降(P＜0.05)，Se組也并未發(fā)現caspase-3的入核表達。由此可見，Se緩解AFB1引起的肉雞肝