結(jié)腸癌細胞和成纖維細胞相互作用中腫瘤細胞IGFBP7表達與Wnt信號通路.pdf

1、結(jié)直腸癌由于其發(fā)病率高和預(yù)后差目前仍是嚴重危害人類健康的常見消化系統(tǒng)惡性腫瘤。近年來隨著腫瘤微環(huán)境理論逐漸受到人們的重視，腫瘤和間質(zhì)的相互作用亦成為腫瘤研究熱點。越來越多的實驗研究表明，腫瘤細胞周圍間質(zhì)可能會分泌某種因子影響腫瘤的發(fā)生發(fā)展；病理學(xué)家已經(jīng)注意到，在結(jié)直腸癌組織中，癌巢周圍出現(xiàn)明顯的促纖維組織增生，提示在結(jié)直腸癌中腫瘤間質(zhì)細胞尤其是成纖維細胞在腫瘤發(fā)生發(fā)展發(fā)揮著重要的作用。
　　 IGFBP7(Insulin-lik

2、egrowthfactorbindingprotein7)即胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7，是我們實驗室首次在結(jié)腸腺癌-正常粘膜的差減文庫中篩選出來的抑癌基因，是一種分泌型蛋白，可以抑制腫瘤細胞生長，促進腫瘤細胞凋亡，與病人良好預(yù)后呈正相關(guān)。我們前期研究表明，結(jié)腸癌細胞和成纖維細胞相互作用能促進結(jié)腸癌細胞IGFBP7表達，促進成纖維細胞活化。
　　 目前研究表明Wnt信號通路是結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展的重要機制之一，那么這個信號通路是否參與

3、了結(jié)腸癌細胞與成纖維細胞的相互作用并直接影響IGFBP7的表達?這正是我們的研究目標。本實驗采用RT-PCR、Real-timePCR、Westernblotting等方法，首先在腫瘤細胞和成纖維細胞相互作用模型(雙層共培養(yǎng)和條件共培養(yǎng)細胞培養(yǎng)模型)中證實相互作用時腫瘤細胞IGFBP7表達升高。接著，通過分別加入Wnt通路的激動劑LiCl和抑制劑DKK-1模擬腫瘤細胞IGFBP7表達變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)加入LiCl后IGFBP7表達明顯下調(diào)，

4、加入DKK-1后IGFBP7表達明顯上升。同時，我們采用相同的方法檢測相互作用系統(tǒng)中Wnt信號通路相關(guān)靶基因如c-my和cyclinD1和相關(guān)蛋白如β-catenin和TCF4的表達變化，發(fā)現(xiàn)靶基因和相關(guān)蛋白的表達均降低。
　　 我們的實驗結(jié)果表明結(jié)腸癌細胞和成纖維細胞相互作用中腫瘤細胞內(nèi)Wnt信號通路受到抑制，并且在腫瘤細胞中的IGFBP7高表達受Wnt信號通路的負性調(diào)節(jié)。
　　 通過上述實驗，我們得到以下結(jié)論：