化療對肝癌侵襲轉(zhuǎn)移潛能的影響及其機(jī)理與干預(yù)—實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景：
　　原發(fā)性肝癌(主要是肝細(xì)胞癌，hepatocellular carcinoma，HCC)是最常見的惡性腫瘤。根治性肝切除、肝移植等根治性治療手段只適于少數(shù)早期病人。而多數(shù)不可切除的肝癌患者，全身化療的緩解率(response rate)僅20％左右，且無證據(jù)表明緩解和生存期的延長存有相關(guān)性。最近，化療導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為惡化的現(xiàn)象受到重視。文獻(xiàn)報(bào)道，動物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)化療可通過損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞和宿主的抗腫瘤免疫系統(tǒng)而促進(jìn)

2、腫瘤播散，即化療的“反作用”；化療還可直接作用于腫瘤細(xì)胞，體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞長期暴露于化療藥物后可獲得顯著增強(qiáng)的侵襲轉(zhuǎn)移能力。然而，體內(nèi)化療是否也會導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為的變化，目前尚不清楚。為此，我們采用人肝癌裸鼠原位移植模型，探討體內(nèi)化療對肝癌侵襲轉(zhuǎn)移潛能的影響，探索可能的機(jī)理，并尋找臨床可用的干預(yù)措施，以期進(jìn)一步提高肝癌化療療效。
　　方法：
　　選用人肝癌細(xì)胞株MHCC97L(中等轉(zhuǎn)移潛能)和HepG2(低轉(zhuǎn)移潛

3、能)，以2μmol/L奧沙利鉑進(jìn)行體外沖擊化療，獲得殘癌細(xì)胞株MHCC97L-oxa和HepG2-oxa。對比研究殘癌細(xì)胞株和母細(xì)胞株在侵襲能力、運(yùn)動能力、增殖能力以及分子表型方面的差異。以MHCC97L細(xì)胞株建立人肝癌裸鼠原位移植模型，研究化療后殘余肝癌的生長、肺轉(zhuǎn)移以及腫瘤分子表型等生物學(xué)特性的變化。選用含5味中藥的“松友飲”小復(fù)方作為干預(yù)手段，并研究其對化療后殘癌生物學(xué)特性的影響。
　　結(jié)果：
　　與母細(xì)胞MHCC97

4、L和HepG2相比，化療后的對應(yīng)殘癌細(xì)胞株MHCC97L-oxa和HepG2-oxa顯示出顯著增強(qiáng)的運(yùn)動(19.17±2.64 vs.29.50±5.28，P=0.002和12.33±2.73 vs.21.17±3.13，P<0.001)和侵襲能力(增強(qiáng)0.89倍，P<0.001和增強(qiáng)1.58倍，P=0.001)。與未接受化療的腫瘤相比，體內(nèi)化療后的殘余肝癌再接種于裸鼠體內(nèi)后顯示出明顯增強(qiáng)的肺轉(zhuǎn)移能力(3/12 vs.10/12，P=0

5、.012)。化療后殘余腫瘤組織發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymaltransition，EMT)，表現(xiàn)為腫瘤細(xì)胞E-cadherin表達(dá)顯著下調(diào)，N-cadherin，vimentin表達(dá)顯著增強(qiáng)，轉(zhuǎn)錄因子Snail表達(dá)上調(diào)，這些變化在體外實(shí)驗(yàn)中得到進(jìn)一步驗(yàn)證。中藥“松友飲”(4.2g/kg和8.4g/kg)有效抑制了化療后殘癌組織的EMT，降低殘癌的肺轉(zhuǎn)移能力(13/15 vs.6/15，P=0.021和1

6、3/15 vs.3/15，P=0.001)，延長模型裸鼠的生存時(shí)間(53.83±4.71天vs.66.67±5.61天，P=0.002和53.83±4.71天vs.81.17±7.36天，P=0.001)。
　　結(jié)論：
　　1.體外和體內(nèi)化療均能通過上皮.間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)誘導(dǎo)殘余肝癌侵襲轉(zhuǎn)移潛能增強(qiáng)。
　　2.中藥“松友飲”有效抑制化療后殘余肝癌侵襲轉(zhuǎn)移潛能的增強(qiáng)，延長模型裸鼠生存時(shí)間。
　　應(yīng)用價(jià)值