骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)大鼠足細(xì)胞損傷的保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的：探討大鼠BMSCs對(duì)大鼠腎臟足細(xì)胞損傷的保護(hù)作用研究。
　　方法：1.從SD大鼠骨髓中提取MSCs，經(jīng)體外擴(kuò)增、純化并進(jìn)行鑒定。2.從SD大鼠腎臟中提取足細(xì)胞，經(jīng)體外培養(yǎng)、并進(jìn)行鑒定。3.體外實(shí)驗(yàn)，分組：正常組：足細(xì)胞；阿霉素組：足細(xì)胞+阿霉素(2ug/ml)；干細(xì)胞組：足細(xì)胞+BMSCs（共培養(yǎng)24h）+阿霉素(2ug/ml)。各實(shí)驗(yàn)組干預(yù)24h、48h、72h后通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組足細(xì)胞的凋亡率。12h、24h、48h

2、后通過(guò)RT-PCR和Real time PCR測(cè)nephrin、synaptopodin mRNA的表達(dá)。Western bolt技術(shù)檢測(cè)各組24h、48h、72h足細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白nephrin、synap topod in的表達(dá)。
　　結(jié)果：1.流式細(xì)胞儀結(jié)果示：24h正常組凋亡率為19.1％，24h阿霉素組凋亡率為45.4%，24h干細(xì)胞組凋亡率為22.7%，24h干細(xì)胞組與阿霉素組相比足細(xì)胞的凋亡顯著減少，減少有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

3、（P<0.01）。48h正常組凋亡率為22.4%，48h阿霉素組凋亡率為32.5%，48h干細(xì)胞組凋亡率為26.2%，48h干細(xì)胞組與阿霉素組相比足細(xì)胞的凋亡減少，減少無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）.72h正常組凋亡率為17.7%，72h阿霉素組凋亡率為29.6%，72h干細(xì)胞組凋亡率為28.7%，72h干細(xì)胞組與阿霉素組相比足細(xì)胞的凋亡減少，減少無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　2.RT-PCR電泳示：12h、24h、48h各時(shí)

4、間點(diǎn)正常組、阿霉素組和干細(xì)胞組nephrin mRNA的表達(dá)無(wú)明顯差異。24h和48h阿霉素組和干細(xì)胞組synaptopodin mRNA的表達(dá)比正常組減少，24h和48h干細(xì)胞組synaptopodin mRNA的表達(dá)比阿霉素組明顯增加。
　　3.Real time PCR結(jié)果示：12h、24h、48h各時(shí)間點(diǎn)正常組、阿霉素組和干細(xì)胞組nephrin mRNA的表達(dá)無(wú)明顯差異。48h阿霉素組和干細(xì)胞組synaptopodin m

5、RNA的表達(dá)比正常組減少，48h干細(xì)胞組synaptopodin mRNA的表達(dá)比阿霉素組明顯增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　4.Western bolt結(jié)果示：24h、48h、72h正常組、阿霉素組和干細(xì)胞組nephrin蛋白的表達(dá)無(wú)明顯差異。48h干細(xì)胞組與阿霉素組相比synaptopodin蛋白表達(dá)明顯增高，24h、72h正常組、阿霉素組和干細(xì)胞組synaptopodin的表達(dá)無(wú)明顯差異。
　　結(jié)論：1.