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文檔簡介
1、人乳頭瘤病毒(human papilloma vivus,HPV)是一種有種屬和組織特異性的雙鏈閉環(huán)的脫氧核糖核酸(DNA)病毒,可引起肛門周圍、外陰生殖器的良惡性損害。HPV病毒持續(xù)性感染是造成尖銳濕疣(human papilloma vivus,CA)復發(fā)或宮頸癌發(fā)生的重要因為,而HPV感染后局部細胞免疫功能低下是HPV持續(xù)性感染的根本因為所在。
載脂蛋白B mRNA編輯酶催化多肽樣蛋白3G(apolipoprotei
2、n B
mRNA-editing enzyme catalytic polypeptide 3 protein G,APOBEC3G)是在人類免疫缺陷病毒的研究過程中發(fā)現(xiàn)的一種人類特有的天然免疫因子,屬于固有免疫家族成員。它不僅能抑制人類免疫缺陷病毒的復制,還能在瞬時表達乙型肝炎病毒的共轉染細胞體系中發(fā)揮顯著抑制病毒復制的生物學功能,并對來自不同宿主的其它逆轉錄病毒成員如鼠白血病病毒、猿免疫缺陷病毒等均具有抑制作用。因此,
3、APOBEC3G具有廣譜的抗病毒活性。但由于APOBEC3G的基因結構及蛋白功能與胞嘧啶脫氨酶家族其它成員非常相似,其基因過度表達可能會導致細胞內基因組不穩(wěn)定性增加,從而參與惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程。
本研究觀察AOPBEC3G蛋白在人體CA、某些皮膚惡性腫瘤等組織中的表達情況,并以銀屑病及正常皮膚組織作為對照,以初步探討APOBEC3G在HPV感染相關皮膚病中的作用。
材料和方法
一、研究對象<
4、br> 1、病史采集完整的CA組織12例,鱗狀細胞癌組織、基底細胞癌組織、角化棘皮瘤組織、銀屑病組織各10例,正常皮膚組織5例。
2、各種組織病例性別及年齡具有可比性,無系統(tǒng)性疾病或其它皮膚病。
二、材料
1、APOBEC3G抗體(ab71634,ABCOM,UK)即用型S-P免疫組化試劑盒PBS緩沖液
2、3-氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色系統(tǒng)
三、實驗方法
5、 制備6u厚石蠟切片??乖邏簾嵝迯汀O群蟮渭油每谷硕嗫寺】笶BA-抗,PBS作陰性對照。DAB顯色,蘇木素復染。脫水、透明、封片。光鏡下觀察。
四、結果判定
光鏡下(×400倍),每張切片隨機選取4個視野,以細胞膜或胞漿內出現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒為陽性。采用半定量積分法,對細胞中陽性細胞的染色強度及陽性細胞數(shù)進行人工判定;顯微圖像分析系統(tǒng)采集圖像,分析陽性表達積分光密度。取平均值,以積分光密度/高倍視野
6、為單位計算,獲得每例標本陽性染色的光密度值及陽性百分比。
五、統(tǒng)計學分析
采用SPSS16.0軟件包進行數(shù)據(jù)處理。分類資料采用X2檢驗,計量資料采用LSD-t檢驗。P<0.05認為有統(tǒng)計學差異。
結果:
1、12例CA組織中,9例呈高表達,1例弱表達,陽性率為91.67%;10例SCC及10例BCC組織中,各有4例呈高表達,各有2例弱表達,陽性率均為60%;10例KA組織中,5例呈
7、高表達,2例弱表達,陽性率均為70%。10例銀屑病中,有1例陽性表達。正常皮膚無表達。
2、CA、SCC、BCC、KA陽性表達分布情況均與對照組織(銀屑病及正常皮膚)具有統(tǒng)計學差異。CA及各種惡性皮膚腫瘤間陽性表達無統(tǒng)計學差異,銀屑病與正常皮膚無統(tǒng)計學差異。
3、CA組織光密度值及陽性百分比最高,分別為17.48及33.51%; 銀屑病及正常皮膚組織最低,分別約為8.51%及7.82%;SCC、BCC、KA界
8、于中間。
4、CA、SCC、BCC、KA的光密度值及陽性百分比均與對照組織(銀屑病及正常皮膚)具有統(tǒng)計學差異。CA與三種皮膚惡性腫瘤之間有統(tǒng)計學差異。三種皮膚腫瘤之間無統(tǒng)計學差異,銀屑病與正常皮膚組織無統(tǒng)計學差異。
結論:
1).APOBEC3G蛋白在大部分HPV感染的CA組織中,呈高水平表達。
2).APOBEC3G蛋白在SCC、BCC、KA組織中,呈中等水平表達。
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