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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
本實(shí)驗(yàn)通過(guò)構(gòu)建apoE-KO小鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型,探討miR-206對(duì)apoE-KO動(dòng)脈粥樣硬化小鼠肝臟膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白肝臟X受體α表達(dá)和膽固醇流出率的影響,進(jìn)一步研究miR-206參與膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)的機(jī)制。
方法:
高脂飲食喂養(yǎng)apoE-KO小鼠30只,建立動(dòng)脈粥樣硬化模型。將小鼠隨機(jī)平均分為3組,A組:PBS對(duì)照組;B組:miR-206 mimic組;C組:miR-206 inhibitor組
2、。分別于腹腔皮下注射PBS溶液、miR-206 mimic溶液、miR-206 inhibitor溶液。4周后,眶靜脈取血檢測(cè)血脂水平,取主動(dòng)脈根部HE染色及油紅O染色觀察動(dòng)脈粥樣硬化程度,熒光定量RT-PCR和Western-blot法檢測(cè)各組小鼠肝臟mRNA相對(duì)表達(dá)量和蛋白含量,液態(tài)閃爍計(jì)數(shù)法檢測(cè)各組小鼠腹腔巨噬細(xì)胞膽固醇的流出率。
結(jié)果:
miR-206 mimic組較對(duì)照組HDL-C水平升高;與對(duì)照組、miR
3、-206 mimic組相比,miR-206 inhibitor組TC、LDL均顯著升高,HDL明顯下降。各組TG無(wú)明顯不同。主動(dòng)脈根部行HE染色、油紅O染色可見(jiàn)對(duì)照組粥樣硬化程度較輕,miR-206 inhibitor組動(dòng)脈粥樣硬化程度最為嚴(yán)重,miR-206 mimic組動(dòng)脈粥樣硬化病變極其微小。與對(duì)照組相比,miR-206 mimic組肝LXRαmRNA和蛋白表達(dá)增多,miR-206 inhibitor組表達(dá)減少。膽固醇流出率的結(jié)果
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