功夫菊酯干擾雌激素的神經(jīng)保護(hù)作用影響小鼠海馬功能的體內(nèi)研究.pdf

1、背景：功夫菊酯是一種常見(jiàn)的Ⅱ型擬除蟲(chóng)菊酯農(nóng)藥，因其低毒、高效、低殘留等特點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用，近年來(lái)有關(guān)功夫菊酯的危害日益引起社會(huì)的關(guān)注。以往關(guān)于功夫菊酯神經(jīng)毒性的研究主要集中于鈉離子通道，這種作用機(jī)制可以較好解釋功夫菊酯急性毒性作用，但不能很好地解釋其較長(zhǎng)時(shí)期的毒性，尤其是神經(jīng)發(fā)育毒性。本課題組早期發(fā)現(xiàn)，出生后早期暴功夫戊菊酯會(huì)影響小鼠的神經(jīng)行為發(fā)育及學(xué)習(xí)記憶。也有研究表明，青春期暴露功夫菊酯會(huì)損害認(rèn)知功能和行為發(fā)育，并且對(duì)雌鼠的損害更嚴(yán)重

2、。已知雌激素在中樞神經(jīng)系統(tǒng)，尤其是海馬結(jié)構(gòu)和功能發(fā)育成熟方面具有重要的作用，而功夫菊酯具有雌激素干擾特性。功夫菊酯很可能通過(guò)干擾雌激素作用而影響海馬發(fā)育。
　　目的：探討功夫菊酯的雌激素干擾特性在突觸發(fā)育中的作用。
　　方法：出生后28天（PND28）的健康雌性ICR小鼠隨機(jī)分為假手術(shù)和卵巢切除（OVX）兩大組12小組：假手術(shù)組分為對(duì)照（Sham）、功夫菊酯（LCT，3.0μg/g）、來(lái)曲唑（Let，芳香化酶抑制劑，1.0μ

3、g/g）及LCT（3.0μg/g）+Let（1.0μg/g）共4個(gè)處理組，OVX組分為對(duì)照（OVX）、雌激素（E2，10.0μg/g）、LCT、Let、E2+LCT、E2+Let、LCT+Let、E2+LCT+Let共8個(gè)處理組，每組10只，經(jīng)腹腔注射給藥，連續(xù)2天，末次給藥24小時(shí)后各組半數(shù)動(dòng)物進(jìn)行行為學(xué)測(cè)試（曠場(chǎng)和Morris水迷宮），余下動(dòng)物麻醉取腦做冰凍切片，用免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)突觸后致密蛋白95（postsynaptic

4、 density protein95，PSD95)。
　　結(jié)果：行為學(xué)測(cè)試發(fā)現(xiàn)，OVX明顯延長(zhǎng)小鼠在曠場(chǎng)第一格潛伏期和水迷宮登臺(tái)潛伏期（與Sham組相比，P<0.05）；補(bǔ)充E2可增加在曠場(chǎng)中跨越的總格數(shù)，縮短水迷宮登臺(tái)潛伏期（OVX+E2組與OVX組比較，P<0.05）；但LCT可影響補(bǔ)充E2產(chǎn)生的效應(yīng)，表現(xiàn)為總格數(shù)和站立次數(shù)明顯減少，登臺(tái)潛伏期略有延長(zhǎng)（OVX+E2+LCT組與OVX+E2組比較，P<0.05）；LCT可延長(zhǎng)S

5、ham小鼠登臺(tái)潛伏期（LCT組與Sham+LCT組比較，P<0.05），但可縮短O(píng)VX小鼠第一格潛伏期及登臺(tái)潛伏期（LCT組與Sham+LCT比較，P<0.05）；在循環(huán)雌激素存在時(shí)，LCT可延長(zhǎng)小鼠在中央格的時(shí)間（Sham+LCT與Sham組比，P<0.05；OVX+E2+LCT組與OVX+LCT組比，皆P<0.05）；在有循環(huán)E2而大腦局部E2合成被阻斷的條件下，LCT可延長(zhǎng)小鼠在曠場(chǎng)第一格潛伏期，減少跨越總格數(shù)、站立次數(shù)（Sham

6、+LCT+Let組與Sham+Let組比較，P<0.05）。免疫熒光組織化學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，OVX可明顯降低海馬CA1、CA3和DG區(qū)PSD95表達(dá)（OVX組與Sham組比較，P<0.05），而E2和LCT均能抑制OVX的這種效應(yīng)（OVX+E2組與OVX組比較，OVX+LCT組與OVX組比較，皆P<0.05）；存在循環(huán)E2條件下，LCT卻下調(diào)PSD95表達(dá)（Sham+LCT組與Sham組比較，OVX+E2+LCT組與OVX+E2組比較，皆P<

7、0.05）；若阻斷局部E2合成，LCT可下調(diào)CA3區(qū)PSD95表達(dá)（OVX+E2+LCT+Let組與OVX+E2+Let組比較，P<0.05）；去除循環(huán)和局部合成E2條件下，LCT可上調(diào)DG區(qū)PSD95表達(dá)（OVX+LCT+Let組與OVX+Let組比較，P<0.05）。
　　結(jié)論：在體內(nèi)雌激素極低或被清除的條件下，功夫菊酯可模擬雌激素對(duì)海馬突觸發(fā)育的促進(jìn)作用；但循環(huán)雌激素存在時(shí)，功夫菊酯可干擾雌激素的效應(yīng)，抑制海馬突觸發(fā)育。這很