HCN4基因在風心二狹房顫患者中表達初探.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：通過分析風濕性心臟病二尖瓣狹窄患者心房肌組織及對照組心房肌組織HCN4基因表達與心房顫動發(fā)生的關系，為風心二狹房顫發(fā)生機制奠定理論基礎，并探討風濕性心臟病二尖瓣狹窄心房纖顫的可能調節(jié)機制。 方法：1.通過半定量逆轉錄-PCR方法(RT-PCR)考察在風心二狹房顫患者和風心二狹無房顫患者HCN4基因mRNA含量表達差異，以HCN4基因mRNA和內參β-actin含量的比值作為評價HCN4基因mRNA表達水平指標。 2

2、.通過PCR產物基因測序，考察實驗中HCN4基因的同源性。 3.通過應用SYBR Green I熒光染料，建立檢測HCN4基因mRNA的實時熒光定量PCR方法(Real Time PCR)研究風心二狹房顫患者心房肌和風心二狹無房顫患者HCN4基因mRNA的定量表達。 結果：1.經RT-PCR技術分析風心二狹房顫組及對照組HCN4基因mRNA與β-actin含量的相對表達值比值(-x±s)分別為0.685±0.168和0.

3、127±0.012，兩組比較，差異有顯著性(t=20.351，P<0.01)。 2.測定HCN4基因cDNA序列同源性為100％，說明PCR擴增產物正是目的基因。 3.建立的實時熒光定量PCR方法在103～107拷貝數/ul的標準品梯度稀釋范圍內，相關系數為0.999。風心二狹房顫組及對照組HCN4基因mRNA與β-actin含量的相對表達值比值(-x±s)分別為1.323±1.226和0.116±0.192(r=5.8

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