RANKL介導(dǎo)下頜功能性前伸后髁突骨改建的機制.pdf

1、目的:
　　 下頜骨髁突是整個下頜骨最為主要的生長區(qū)，其生長發(fā)育是通過下頜骨髁突的軟骨內(nèi)成骨來完成的。大量研究表明，骨骼的生長需要各種調(diào)節(jié)因子來共同調(diào)控，骨組織始終都在進行新陳代謝，并且是具有重建功能的生物組織。當(dāng)骨組織所處的應(yīng)力環(huán)境發(fā)生改變，即所處的動態(tài)平衡被打破，骨組織會通過骨重建這一組織改建過程來進行骨組織的骨量和骨質(zhì)的改變，在一個新的應(yīng)力環(huán)境下達到動態(tài)平衡。在Ⅱ類錯合的功能矯治中，下頜功能性前伸后，髁突部的骨改建是整個治

2、療成功的關(guān)鍵。在下頜骨髁突骨改建的過程中破骨細胞起著不可或缺的作用，RANKL是介導(dǎo)破骨細胞形成所必需的調(diào)控因子，RANKL表達的變化會影響破骨細胞的形成以及骨改建的完成。在以往的研究中，學(xué)者大多著眼于骨改建過程中成骨細胞在其中所起的作用而破骨細胞鮮有報道，因此，本實驗通過研究功能性前伸下頜后，大鼠下頜骨髁突軟骨部RANKL的變化來進一步探討RANKL及其介導(dǎo)形成的破骨細胞在髁突部骨改建中的機制。
　　 方法:
　　 選

3、擇4周齡健康Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠，60只，體重90g左右，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，將其按照隨機分組的方式分為實驗組和對照組，每組30只。同時，實驗組內(nèi)同樣按照隨機分組的方式分為6組每組5只，即A組，B組，C組，D組，E組，F(xiàn)組。對照組內(nèi)30只按照隨機分組方式分為6組，每組5只，即a組，b組，c組，d組，e組，f組。實驗組大鼠全天24小時持續(xù)戴用矯治裝置，同時注意觀察配戴情況，若矯治裝置脫落或戴用情況不符合配戴要求則即刻

4、調(diào)整，重新消毒粘接，以保證每天的戴用時間。對照組不做處理，為自然生長組。按照實驗預(yù)定時間即配戴矯治器后第一天，第三天，第七天，第十四天，第二十一天，第二十八天依次處死A、a組，B、b組，C、c組，D、d組，E、e組，F(xiàn)、f組大鼠，斷頸處死取材保存于4％多聚甲醛(PH=7.4)中固定24小時。而后放入10％EDTA中(PH=7.2)室溫脫鈣至標(biāo)本軟化。然后進行切片，通過免疫組織化學(xué)染色應(yīng)用多功能真彩色細胞圖象分析管理系統(tǒng)檢測不同分組大鼠的

5、髁突軟骨后份RANKL表達變化。應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對所有數(shù)據(jù)進行處理，從而分析不同時間點RANKL在下頜骨髁突軟骨中表達的變化。
　　 結(jié)果:
　　 1、形態(tài)學(xué)變化
　　 實驗組大鼠下頜骨位置在整個實驗過程中一直處于適度前伸狀態(tài)，下頜位置以下頜切牙的位置為標(biāo)記，明顯向前下方向移動，前牙為對刃狀態(tài)，已不能后退，未見明顯的左右偏斜。
　　 2、RANKL免疫組化結(jié)果
　　 RANKL的陽性表

6、達顯示細胞膜被染為棕黃色。陽性細胞明顯區(qū)別于背景染色。RANKL在各層軟骨細胞上均可表達，主要表達在增殖層。對照組中RANKL的陽性表達強度逐漸降低，呈現(xiàn)出增齡性變化，實驗組中RANKL的表達水平與對照組相比，實驗組第一天RANKL的表達強度與其相應(yīng)的對照組相比無明顯統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。在第三天時實驗組RANKL表達低于對照組(P＜0.05)，在實驗的第七天，實驗組RANKL的表達低于對照組，出現(xiàn)了表達水平的最低值(P＜0.05

7、)。第十四天時，實驗組的RANKL表達與對照組相比仍處于低表達狀態(tài)，有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，但比第七天實驗組RANKL的表達量增多，即RANKL表達量回升。實驗的二十一天時，實驗組RANKL的表達與對照組相比(P＜0.05)，統(tǒng)計學(xué)差異仍然存在，但與第十四天實驗組RANKL的表達量相比較，其表達量繼續(xù)回升。第二十八天時實驗組RANKL表達水平接近于對照組的表達水平，無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論: