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文檔簡介
1、目的:觀察骨形成蛋白2(BMP2)、血管內皮生長因子165(VEGF165)雙基因轉染的小鼠骨髄間充質干細胞復合自固化磷酸鈣人工骨后的異位誘導成骨能力。
方法:全骨髓貼壁培養(yǎng)法培養(yǎng)原代小鼠骨髓間充質干細胞,傳到第3-4代后在脂質體2000介導下將真核表達質粒pIRES-BMP2-VEGF165導入小鼠骨髄間充質干細胞,以轉染空白質粒作為陰性對照。用免疫組織化學方法觀察BMP2和VEGF165兩種基因在小鼠骨髄間充質干細胞內的表
2、達;以自固化磷酸鈣人工骨為支架,建立真核表達質粒pIRES-BMP2-VEGF165雙基因修飾的組織工程骨植入小鼠右側股骨肌袋內;將復合轉染空白質粒小鼠骨髄間充質干細胞的自固化磷酸鈣人工骨植入小鼠左側股骨肌袋內。術后第3天、第2、4、6周進行X線攝影對比,術后第2、4、6周分別處死小鼠,取肌袋內組織行病理切片染色,觀察成骨情況。
結果:小鼠骨髓間充質干細胞在轉染BMP2、VEGF165后有顯著的相關蛋白的表達,由真核表達質粒p
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