表皮神經嵴干細胞修復大鼠坐骨神經缺損.pdf

1、周圍神經的缺損修復和功能重建一直是神經外科領域的難題之一。自體神經移植是目前臨床上常規(guī)的治療方法，但由于供體神經缺乏、修復長度有限、供體區(qū)域功能喪失、神經瘤和自發(fā)神經痛等問題，其臨床應用受到很大限制。同種異體神經移植除了要面對以上問題外，還要克服免疫排斥反應。因此，應用組織工程種子細胞修復周圍神經缺損可以為這一難題的解決提供幫助。
　　神經嵴干細胞是一種多向潛能神經干細胞，它是周圍神經系統(tǒng)的原基，也是Schwann cells的祖

2、細胞。毛囊來源的神經嵴干細胞(Epidermal Neural CrestStem Cells，EPI-NCSCs)由于取材方便，具有分化為周圍神經系統(tǒng)神經元和膠質細胞的潛能，是一種具有良好應用前景的組織工程種子細胞。目前，在神經損傷修復領域中，EPI-NCSCs主要被應用于脊髓損傷的修復。聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物(poly(DL-lactide-co-glycolide)，PLGA)是一種人工合成生物可降解性材料，被認為是一種較為理想

3、的人工神經支架材料。為了探討EPI-NCSCs對周圍神經缺損的修復作用，對原代培養(yǎng)的GFP-SD大鼠來源的EPI-NCSCs的體外性質進行了考察，并以其為種子細胞，將其等量與細胞外基質(Extracellular matrix，ECM)混合后，預置入PLGA導管中，同時，以等量的達爾伯克（氏）改良伊格爾（氏）培養(yǎng)基(Dulbecco's Modified Eagl's medium，DMEM)代替EPI-NCSCs作為對照，以用于修復大

4、鼠坐骨神經10 mm距離的缺失。噻唑藍(Methylthiazolyltetrazolium，MTT)試驗結果顯示，EPI-NCSCs在PLGA膜上的初期粘附率為89.7％。在第1、3、5、7天細胞相對增殖率分別為89.3％、87.6％、85.6％、96.6％。細胞周期與DNA倍體分析表明，與PLGA共培養(yǎng)的EPI-NCSCs與單獨培養(yǎng)的EPI-NCSCs相比較，二者的細胞周期變化趨勢相同，增殖指數變化趨勢也相同。RT-PCR和熒光免疫