microRNA-200c在胃癌SGC7901-CDDP細(xì)胞中的作用及其機(jī)制的研究.pdf

1、在我國(guó)，胃癌的發(fā)病率很高，由于胃癌篩查沒(méi)有得到普及和重視，大多數(shù)胃癌到中晚期才得到診斷，化療仍是主要的治療手段。但是腫瘤原發(fā)或繼發(fā)性耐藥的產(chǎn)生致使腫瘤對(duì)化療不敏感，最終導(dǎo)致治療的失敗。多年來(lái)對(duì)耐藥相關(guān)基因功能的研究揭示了眾多的耐藥機(jī)制，在指導(dǎo)臨床治療中逐漸顯示出重要的作用，然而由于這些基因之間相互缺乏聯(lián)系，因而所進(jìn)行的研究也相對(duì)獨(dú)立。近年來(lái)研究顯示一類(lèi)長(zhǎng)度為21～25nt的單鏈非編碼微小RNA(microRNA)在腫瘤發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重

2、要的作用。生物信息學(xué)顯示microRNA通過(guò)調(diào)節(jié)不同的基因而發(fā)揮重要的生物學(xué)效應(yīng)，從而使一些看似相互獨(dú)立的基因之間建立了緊密的聯(lián)系。在腫瘤耐藥方面，研究顯示相同microRNA能夠通過(guò)調(diào)控不同的靶點(diǎn)而影響腫瘤細(xì)胞對(duì)抗腫瘤藥物的敏感性。在胃癌化療臨床藥物的選擇中，順鉑(cisplatin，CDDP)仍是基礎(chǔ)化療藥物之一。SGC7901/CDDP是胃癌順鉑耐藥的細(xì)胞株。雖然已有一些關(guān)于其耐藥機(jī)制的報(bào)道，但是目前尚未有對(duì)該細(xì)胞的microRN

3、A表達(dá)譜特征的報(bào)道，同時(shí)microRNA在胃癌順鉑耐藥過(guò)程中所起的作用也沒(méi)有深入的研究。本研究對(duì)SGC7901/CDDP細(xì)胞的耐藥特性進(jìn)行了分析；對(duì)SGC7901/CDDP及其親代順鉑敏感的SGC7901細(xì)胞進(jìn)行microRNA表達(dá)譜的高通量篩選，通過(guò)與SGC7901細(xì)胞microRNA的表達(dá)譜進(jìn)行對(duì)比，篩選出其中差異表達(dá)的microRNA，并應(yīng)用靶點(diǎn)預(yù)測(cè)軟件進(jìn)行靶點(diǎn)預(yù)測(cè)及生物信息學(xué)分析，尋找潛在的microRNA靶點(diǎn)或調(diào)控通路，以期改

4、善胃癌細(xì)胞的耐藥問(wèn)題。在建立SGC7901/CDDP細(xì)胞microRNA表達(dá)譜的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步探討了microRNA-200c對(duì)胃癌SGC7901/CDDP細(xì)胞耐藥及增殖的影響，并觀(guān)察了其對(duì)E-cadherin、PTEN/Akt通路及凋亡蛋白Bcl-2和BAX的調(diào)控作用。同時(shí)通過(guò)抑制高表達(dá)E-cadherin的SGC7901細(xì)胞中E-cadherin的表達(dá)，觀(guān)察細(xì)胞的耐藥性和增殖能力的改變和PTEN/Akt通路及凋亡蛋白Bcl-2和BA

5、X的變化，分析E-cadherin對(duì)細(xì)胞耐藥和增殖的影響及其機(jī)制，探討E-cadherin是否介導(dǎo)了microRNA-200c對(duì)PTEN/Akt通路及凋亡蛋白的間接調(diào)控。
　　 第一部分胃癌SGC7901/CDDP細(xì)胞microRNA表達(dá)譜及其生物信息學(xué)分析
　　 目的：研究SGC7901/CDDP細(xì)胞的耐藥特性，通過(guò)對(duì)比SGC7901/CDDP耐藥細(xì)胞與親代細(xì)胞microRNA表達(dá)譜的差異，嘗試在microRNA水平尋

6、找到胃癌細(xì)胞耐藥的機(jī)制和改善耐藥的潛在治療靶點(diǎn)。
　　 方法：采用MTT法檢測(cè)SGC7901/CDDP及SGC7901細(xì)胞對(duì)順鉑、阿霉素、5-氟脲嘧啶及紫杉醇的藥物敏感性；采用microRNA芯片檢測(cè)兩株細(xì)胞的microRNA表達(dá)譜并進(jìn)行比對(duì)篩選出差異表達(dá)的microRNA;對(duì)異常表達(dá)的microRNA分別應(yīng)用TargetScan(http://www.targetscan．org/)及MicroCosm Targets Ver

7、sion5(http://www.ebi.ac.uk/enright-srv/microcosm/htdocs/targets/v5/)預(yù)測(cè)microRNA靶點(diǎn)，并進(jìn)行比對(duì)后篩選出兩種方法均能預(yù)測(cè)到的共同的靶點(diǎn)；同時(shí)根據(jù)靶點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的microRNA表達(dá)改變情況將靶點(diǎn)分為microRNA表達(dá)降低組和microRNA表達(dá)增高組。對(duì)microRNA表達(dá)降低組和microRNA表達(dá)增高組的靶點(diǎn)進(jìn)一步采用Blast2GO進(jìn)行在線(xiàn)批量GO分析(ht

8、tp://www.blast2go.org/start_blast2go)，對(duì)靶點(diǎn)的生物學(xué)進(jìn)程進(jìn)行注釋?zhuān)A(yù)測(cè)microRNA參與的生物學(xué)功能。
　　 結(jié)果：
　　 1 兩株細(xì)胞對(duì)順鉑、阿霉素、5-氟脲嘧啶及紫杉醇的敏感性：不同濃度的順鉑、阿霉素、5-氟脲嘧啶及紫杉醇作用48h后，SGC7901/CDDP及SGC7901兩株細(xì)胞的存活率不同。SGC7901/CDDP細(xì)胞對(duì)順鉑、阿霉素、5-氟脲嘧啶及紫杉醇的IC50分別為：

9、11.245±0.272mg/L、0.763±0.043mg/L、12.154±2.036mg/L和3.277±0.426mg/L;SGC7901細(xì)胞對(duì)順鉑、阿霉素、5-氟脲嘧啶及紫杉醇的IC50分別為：2.206±0.256mg/L、0.229±0.020mg/L、4.481±0.544mg/L和1.528±0.097mg/L。與SGC7901細(xì)胞相比，SGC7901/CDDP對(duì)順鉑、阿霉素、5-氟脲嘧啶及紫杉醇的IC50均顯著高于S

10、GC7901細(xì)胞(P＜0.05)，SGC7901/CDDP對(duì)四種抗腫瘤藥物的敏感性降低。
　　 2 RNA的質(zhì)量檢測(cè)：從SGC7901/CDDP及SGC7901細(xì)胞提取出總RNA的濃度分別為：1145.77mg/L和1853.74mg/L，A260/A280值均在1.9～2.0之間，從甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果來(lái)看。其18S和28S條帶清晰，亮度比約為1：2，總RNA純度達(dá)到實(shí)驗(yàn)要求且無(wú)明顯降解。
　　 3 microR

11、NA芯片檢測(cè)結(jié)果：經(jīng)Hy3熒光標(biāo)記、純化，進(jìn)行芯片雜交，圖像采集，數(shù)據(jù)進(jìn)行歸一化處理后，以?xún)煞N細(xì)胞Hy3熒光標(biāo)記信號(hào)強(qiáng)度的比值≤0.5或≥2為標(biāo)準(zhǔn)判定差異表達(dá)microRNA。結(jié)果顯示：與SGC7901細(xì)胞相比，SGC7901/CDDP細(xì)胞中表達(dá)下調(diào)超過(guò)2倍的microRNA有14個(gè)，分別為：microRNA-33a、microRNA-200c、microRNA-302c*、microRNA-488、microRNA-148a、micr

12、oRNA-141、microRNA-212、microRNA-576-3p、microRNA-660、microRNA-338-3p、microRNA-24-1*、microRNA-589、microRNA-887和microRNA-22*;表達(dá)上調(diào)超過(guò)2倍的microRNA有5個(gè)，分別為：microRNA-1246、microRNA-943、microRNA-1290、microRNA-516a-5p和microRNA-34b。

13、>　　 4 microRNA預(yù)測(cè)靶點(diǎn)的生物信息學(xué)分析結(jié)果：microRNA表達(dá)降低組共有451個(gè)預(yù)測(cè)靶點(diǎn)，Blast2GO分析顯示這些靶點(diǎn)參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、蛋白質(zhì)磷酸化、跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)、藥物敏感性、細(xì)胞周期、分化、凋亡、增殖、粘附、DNA修復(fù)等生物學(xué)進(jìn)程。microRNA表達(dá)增高組共有98個(gè)預(yù)測(cè)靶點(diǎn)，Blast2GO分析顯示這些靶點(diǎn)參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)、細(xì)胞周期、凋亡、增殖、分化、組織發(fā)生等生物學(xué)進(jìn)程。
　　 結(jié)論

14、：
　　 1 與親代胃癌SGC7901細(xì)胞比較，胃癌SGC7901/CDDP細(xì)胞除了對(duì)順鉑耐藥性顯著增高外，其對(duì)阿霉素、5-氟脲嘧啶及紫杉醇的耐藥性也出現(xiàn)增加，呈現(xiàn)出多藥耐藥的表型。
　　 2 通過(guò)利用microRNA芯片篩選出胃癌順鉑耐藥SGC7901/CDDP細(xì)胞及其親本SGC7901細(xì)胞之間差異表達(dá)的microRNAs，其中microRNA-33a、microRNA-200c、microRNA-302c*、micr

15、oRNA-488、microRNA-148a、microRNA-141、microRNA-212等14個(gè)microRNAs在SGC7901/CDDP細(xì)胞中表達(dá)下調(diào)、microRNA-1246、microRNA-943、microRNA-1290、microRNA-516a-5p、microRNA-34b在SGC7901/CDDP細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)。
　　 3 通過(guò)對(duì)這些異常改變microRNA的預(yù)測(cè)靶點(diǎn)進(jìn)行GO分析，提示這些異常表達(dá)

16、的microRNA具有復(fù)雜的生物學(xué)效應(yīng)，表明多個(gè)microRNA參與了SGC7901/CDDP細(xì)胞的多藥耐藥。
　　 第二部分 microRNA-200c對(duì)胃癌SGC7901/CDDP細(xì)胞耐藥和增殖的影響
　　 目的：microRNA-200c是我們?cè)谏弦徊糠謱?shí)驗(yàn)中通過(guò)microRNA芯片篩選出的SGC7901/CDDP耐藥細(xì)胞與親代SGC7901細(xì)胞表達(dá)差異的microRNA。本部分實(shí)驗(yàn)試圖進(jìn)一步驗(yàn)證microRNA芯

17、片篩選的結(jié)果，同時(shí)通過(guò)改變microRNA-200c的表達(dá)探索其對(duì)SGC7901/CDDP細(xì)胞藥物敏感性及增殖所起的作用。
　　 方法：采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR對(duì)microRNA芯片篩選出的microRNA-200c的表達(dá)水平進(jìn)行驗(yàn)證；采用siPORTTM NeoFXTM Transfection Agent將microRNA-200c前體（pre-200c）或陰性對(duì)照序列轉(zhuǎn)染到SGC7901/CDDP細(xì)胞中，轉(zhuǎn)染24h后提取細(xì)胞

18、總RNA采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)microRNA-200c表達(dá)水平的改變；采用MTT法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后的SGC7901/CDDP細(xì)胞對(duì)順鉑、阿霉素、5-氟脲嘧啶及紫杉醇敏感性的改變；采用細(xì)胞計(jì)數(shù)法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后的SGC7901/CDDP細(xì)胞體外增殖能力的改變。
　　 結(jié)果：
　　 1 microRNA-200c在兩株細(xì)胞中表達(dá)的差異：實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示；SGC7901/CDDP細(xì)胞microRNA-200c的△Ct為15

19、.470±0.036，SGC7901細(xì)胞的△Ct為14.657±0.229。SGC7901/CDDP細(xì)胞microRNA-200c的相對(duì)表達(dá)水平是SGC7901細(xì)胞的0.573±0.084倍，顯著低子敏感株細(xì)胞的表達(dá)(P＜0.05)。
　　 2 SGC7901/CDDP細(xì)胞轉(zhuǎn)染24h后microRNA-200c的表達(dá)改變：實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示SGC7901/CDDP細(xì)胞轉(zhuǎn)染pre-200c24h后microRNA-200c

20、的△Ct為12.660±0.079，陰性對(duì)照組△Ct為15.493±0.080。細(xì)胞轉(zhuǎn)染pre-200c24h后microRNA-200c相對(duì)表達(dá)水平是陰性對(duì)照組的7.128±0.159倍(P＜0.05)。
　　 3 microRNA-200c對(duì)SGC7901/CDDP細(xì)胞耐藥性的影響：轉(zhuǎn)染pre-200c后的SGC7901/CDDP細(xì)胞增加了對(duì)順鉑、阿霉素、5-氟脲嘧啶及紫杉醇的敏感性。IC50分別為：7.518±0.186m

21、g/L、0.381±0.053mg/L、7.267±0.090mg/L及1.705±0.332mg/L;陰性對(duì)照組分別為：12.180±0.294mg/L、0.721±0.034mg/L、11.534±0.598mg/L及3.140±0.403mg/L。兩者差異顯著(P＜0.05）。
　　 4 microRNA-200c對(duì)SGC7901/CDDP細(xì)胞增殖能力的影響：轉(zhuǎn)染pre-200c的SGC7901/CDDP細(xì)胞接種后從第3天

22、開(kāi)始細(xì)胞數(shù)目顯著低于陰性對(duì)照組(P＜0.05），增殖能力顯著降低。
　　 結(jié)論：
　　 1 通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR證實(shí)microRNA-200c在胃癌順鉑耐藥細(xì)胞株SGC7901/CDDP中表達(dá)下調(diào)，驗(yàn)證了microRNA芯片的結(jié)果。
　　 2 上調(diào)microRNA-200c的表達(dá)能顯著增加SGC7901/CDDP細(xì)胞在體外對(duì)順鉑、阿霉素、5-氟脲嘧啶及紫杉醇四種抗腫瘤藥物的敏感性，發(fā)揮化療增敏作用。
　　

23、 3 上調(diào)microRNA-200c的表達(dá)能顯著抑制SGC7901/CDDP細(xì)胞的體外增殖能力。
　　 第三部分 microRNA-200c逆轉(zhuǎn)SGC7901/CDDP細(xì)胞耐藥及抑制增殖的分子機(jī)制
　　 目的：為了明確microRNA-200c逆轉(zhuǎn)SGC7901/CDDP細(xì)脆耐藥及抑制增殖的分子機(jī)制，我們?cè)噲D通過(guò)分析SGC7901/CDDP耐藥細(xì)胞與親代SGC7901細(xì)胞一些相關(guān)蛋白E-cadherin、PTEN、p-

24、Akt、Akt、Bcl-2和BAX表達(dá)的差異，以及microRNA-200c表達(dá)增加后這些蛋白表達(dá)水平的變化，尋找microRNA-200c調(diào)控的相關(guān)蛋白及使SGC7901/CDDP細(xì)胞發(fā)生耐藥的效應(yīng)蛋白。
　　 方法：采用Western blot法檢測(cè)SGC7901/CDDP及SGC7901細(xì)胞中E-cadherin、PTEN、p-Akt、Akt、Bcl-2和BAX蛋白表達(dá)差異；采用siPORTTM NeoFXTM Trans

25、fection Agent將pre-200c或陰性對(duì)照序列轉(zhuǎn)染到SGC7901/CDDP細(xì)胞中，轉(zhuǎn)染后72h提取細(xì)胞總蛋白，采用Western blot法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后的SGC7901/CDDP細(xì)脆E-cadherin、PTEN、p-Akt、Akt、Bcl-2和BAX蛋白表達(dá)的改變。
　　 結(jié)果：
　　 1 兩株細(xì)胞中E-cadherin、PTEN、p-Akt、Akt、Bcl-2和BAX蛋白表達(dá)：SGC7901/CDDP細(xì)胞

26、E-cadherin、PTEN、p-Akt、Akt、Bcl-2和BAX蛋白的相對(duì)表達(dá)量分別為：0.098±0.030、0.178±0.064、1.019±0.093、1.181±0.102、0.267±0.018和0.215±0.026;SGC7901細(xì)胞E-cadherin、PTEN、p-Akt、Akt、Bcl-2和BAX蛋白的相對(duì)表達(dá)量分別為：0.467±0.061、874±0.056、0.166±0.017、1.231±0.163

27、、0.108±0.011和0.366±0.017。與SGC7901細(xì)胞相比，SGC7901/CDDP細(xì)胞中p-Akt和Bcl-2蛋白的相對(duì)表達(dá)量顯著增高(P＜0.05），而E-cadherin、PTEN和BAX蛋白的相對(duì)表達(dá)量顯著降低（P＜0.05），總Akt的相對(duì)表達(dá)量在兩組之間未見(jiàn)顯著差異(P＞0.05)。
　　 2 microRNA-200c對(duì)SGC7901/CDDP細(xì)胞E-cadherin、PTEN、p-Akt、Akt、

28、Bcl-2和BAX蛋白表達(dá)的影響：SGC7901/CDDP細(xì)胞轉(zhuǎn)染pre-200c后E-cadherin、PTEN、p-Akt、Akt、Bcl-2和BAX蛋白的相對(duì)表達(dá)量分別為：0.471±0.010、0.589±0.016、0.220±0.035、1.255±0.116、0.074±0.008和0.380±0.008;陰性對(duì)照組的E-cadherin、PTEN、p-Akt、Akt、Bcl-2和BAX蛋白的相對(duì)表達(dá)量分別為：0.109±

29、0.002、0.111±0.002、0.687±0.086、1.291±0.117、0.442±0.020和0.111±0.005。轉(zhuǎn)染pre-200c組細(xì)胞的E-cadherin、PTEN、BAX蛋白的相對(duì)表達(dá)量顯著高于陰性對(duì)照組(P＜0.05)，而p-Akt及Bcl-2蛋白的表達(dá)顯著低于陰性對(duì)照組(P＜0.05），總Akt的相對(duì)表達(dá)量在兩組之間未見(jiàn)顯著差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1 SGC7901/C

30、DDP細(xì)胞耐藥表型與E-cadherin、PTEN及BAX蛋白表達(dá)的下降、Akt通路激活和Bcl-2蛋白的表達(dá)增加有關(guān)。
　　 2 microRNA-200c對(duì)SGC7901/CDDP細(xì)胞耐藥逆轉(zhuǎn)和增殖抑制的作用與誘導(dǎo)E-cadherin、PTEN及BAX蛋白的表達(dá)、抑制Akt通路的激活和下調(diào)Bcl-2蛋白的表達(dá)有關(guān)。
　　 第四部分 E-cadherin siRNA對(duì)SGC7901細(xì)胞耐藥與增殖的影響及分子機(jī)制研究

31、r>　　 目的：前一部分的研究結(jié)果提示microRNA-200c參與調(diào)控一系列耐藥相關(guān)蛋白，為了進(jìn)一步探討microRNA-200c與這些蛋白以及這些蛋白彼此之間的信號(hào)傳導(dǎo)順序，我們根據(jù)其它研究的結(jié)果，研究E-cadherin是否介導(dǎo)了從microRNA-200c傳導(dǎo)下來(lái)的調(diào)控信息，同時(shí)探討E-cadherin對(duì)SGC7901細(xì)胞耐藥和增殖的影響。
　　 方法：采用Lipofectamine2000將E-cadherin si

32、RNA或其陰性對(duì)照序列轉(zhuǎn)染到SGC7901細(xì)胞中，轉(zhuǎn)染后24、48、72h分別提取細(xì)胞總蛋白采用Western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞的E-cadherin蛋白的抑制效率；SGC7901細(xì)胞轉(zhuǎn)染24h后采用MTT法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后的SGC7901細(xì)胞對(duì)順鉑、阿霉素、5-氟脲嘧啶及紫杉醇敏感性的改變，采用細(xì)胞計(jì)數(shù)法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后的SGC7901細(xì)胞體外增殖能力的改變；SGC7901細(xì)胞轉(zhuǎn)染72h后提取細(xì)胞的總蛋白，采用Western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)

33、染后細(xì)胞的PTEN、p-Akt、Akt、Bcl-2和BAX蛋白表達(dá)的改變。
　　 結(jié)果：
　　 1 SGC7901細(xì)胞轉(zhuǎn)染后的E-cadherin蛋白表達(dá)改變：SGC7901細(xì)胞轉(zhuǎn)染E-cadherin siRNA24、48和72h后E-cadherin蛋白的相對(duì)表達(dá)量分別為：0.244±0.006、0.155±0.007和0.118±0.014，陰性對(duì)照組為0.527±0.006，轉(zhuǎn)染E-cadherin siRNA后

34、E-cadherin蛋白的表達(dá)受到顯著抑制（P＜0.05）。
　　 2 SGC7901細(xì)胞轉(zhuǎn)染E-cadherin siRNA后對(duì)化療藥物敏感性的改變：轉(zhuǎn)染E-cadherin siRNA后的SGC7901細(xì)胞降低了對(duì)順鉑、阿霉素、5-氟脲嘧啶和紫杉醇的敏感性。IC50分別為：4.375±0.199mg/L、0.368±0.042mg/L、6.855±0.780mg/L和2.530±0.259mg/L;陰性對(duì)照組分別為：2.88

35、2±0.166mg/L、0.228±0.012mg/L、4.058±0.946mg/L和1.483±0.225mg/L。兩組差異顯著（P＜0.05）。
　　 3 E-cadherin siRNA對(duì)SGC7901細(xì)胞增殖能力的影響：轉(zhuǎn)染E-cadherin siRNA的SGC7901細(xì)胞接種后從第4天開(kāi)始細(xì)胞數(shù)目顯著高于陰性對(duì)照組（P＜0.05），細(xì)胞的增殖能力顯著增強(qiáng)。
　　 4 E-cadherin siRNA對(duì)SGC

36、7901細(xì)胞PTEN、p-Akt、Akt、Bcl-2和BAX蛋白表達(dá)的影響：轉(zhuǎn)染E-cadherin siRNA72h后SGC7901細(xì)胞的PTEN、p-Akt、Akt、Bcl-2和BAX蛋白的相對(duì)表達(dá)量分別為：0.148±0.010、0.455±0.034、1.045±0.182、0.328±0.014和0.139±0.013;轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照序列72h后SGC7901細(xì)胞的PTEN、p-Akt、Akt、Bcl-2和BAX蛋白的相對(duì)表達(dá)量

37、分別為：0.531±0.014、0.224±0.049、1.158±0.143、0.114±0.012和0.369±0.016。轉(zhuǎn)染E-cadherin siRNA72h后SGC7901細(xì)胞的p-Akt和Bcl-2蛋白的相對(duì)表達(dá)量顯著高于陰性對(duì)照組，而PTEN和BAX蛋白的相對(duì)表達(dá)量顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)，總Akt的相對(duì)表達(dá)量在兩組之間未見(jiàn)顯著差異(P＞0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1 抑制E-cadheri

38、n的表達(dá)能顯著降低SGC7901細(xì)胞在體外對(duì)順鉑、阿霉素、5-氟脲嘧啶及紫杉醇四種抗腫瘤藥物的敏感性，增強(qiáng)了細(xì)胞對(duì)化療藥物的耐受。
　　 2 抑制E-cadherin的表達(dá)能顯著改變SGC7901細(xì)胞的體外增殖能力，導(dǎo)致細(xì)胞增殖能力增加。
　　 3 抑制E-cadherin表達(dá)導(dǎo)致的SGC7901細(xì)胞耐藥和增殖與下調(diào)PTEN及BAX蛋白的表達(dá)、激活A(yù)kt信號(hào)通路和上調(diào)Bcl-2蛋白的表達(dá)有關(guān)。
　　 4 在胃癌細(xì)