房顫患者心房肌細胞鈣調控蛋白表達及其基因轉錄的研究.pdf

1、心房纖顫(atrial fibrillation，簡稱房顫)業(yè)已成為最常見的心律失常之一，據(jù)統(tǒng)計，60歲以上人群中，房顫發(fā)生率高達1％，并隨年齡而增加。其臨床意義主要在于對血流動力學的影響和較高的體循環(huán)栓塞發(fā)生率。據(jù)報道房顫時心排血量減少達25％或以上；無瓣膜病合并房顫較無房顫者，腦卒中發(fā)生機會高5～7倍，而瓣膜病房顫腦栓塞發(fā)生率更高，但迄今為止，其發(fā)生和維持機制仍未完全闡明，故無論是藥物、射頻消融、雙心房起搏、外科手術或植入式心房除顫

2、器等手段，對房顫的復律和預防、竇性心律維持、心室率控制乃至栓塞的預防和治療，均未取得突破性進展，給患者、家庭、單位、社會、國家?guī)砹藰O大的痛苦與沉重的負擔，業(yè)已與慢性心力衰竭一起成為21世紀全球心血管病學工作者面臨的重大挑戰(zhàn)。 國內外研究表明，房顫的自然史隨著時間的推移趨于惡化，即：陣發(fā)性房顫的發(fā)作會隨著時間的推移趨于頻繁、持續(xù)時間延長，并常進展為持續(xù)性或慢性房顫；房顫病程越短，藥物或電復律的成功率越高。這些發(fā)現(xiàn)提示房顫發(fā)作本身

3、會改變心房的特性，增加房顫維持和復發(fā)的可能性。這種由房顫誘發(fā)的心房電生理改變促進了房顫的發(fā)生和永久化，被稱為心房電生理重構(electrophysiological remodeling，EPR)。EPR公認的最重要特征是心房動作電位時程及不應期縮短，而心肌細胞外向電流的凈增或內向電流的凈減均可使動作電位和不應期縮短。房顫時持續(xù)快速心房率會產(chǎn)生細胞內鈣超載，其可能機制包括心房快速去極化、T-型Ca2+內流增加、肌漿網(wǎng)Ca2+-ATP酶(

4、SR Ca2+-ATPase)mRNA表達下降等諸多因素。隨著內向鈣離子流的高速率及細胞缺乏適應性反應，鈣超載就會達到威脅細胞活力的程度，通過負反饋機制，引起L型鈣離子流(Ica)顯著的功能性下降，并誘導L型鈣通道(L-type Ca2+)蛋白表達的下調，從而引發(fā)通道結構本身的變化。這就使細胞內Ca2+濃度下降，動作電位平臺期縮短，EPR發(fā)生，房顫得以復發(fā)、維持。迄今為止，國外對房顫機制的研究多見于動物實驗，人體研究尚不多見，且鮮見對同

5、一組病例L型鈣通道和肌漿網(wǎng)Ca2+-ATP酶蛋白質表達研究的報道；國內對房顫患者L型鈣通道和肌漿網(wǎng)Ca2+-ATP酶表達的研究則更為少見。 目的：通過對房顫患者和竇性心律對照者心肌細胞的主要鈣離子(ca2+)調控蛋白-細胞膜L型-Ca2+通道和肌漿網(wǎng)Ca2+-ATPase表達的研究，探討房顫發(fā)生和維持的分子生物學機制，掀開房顫發(fā)生及維持機制的冰山一角，以期為有效防治房顫的后續(xù)研究奠定基石出。 方法：63例行心臟手術的病人

6、(包括慢性房顫、陣發(fā)性房顫和竇性心律三組)，術中取右心耳和(或)左房標本約200mg，立即液氮速凍，-70℃存?zhèn)溆?，術前術后收集詳細臨床資料。提取蛋白并測定樣本總蛋白濃度，采用western印跡法(Western-blotting)測定心房肌L型-Ca2+通道和Ca2+-ATPase的表達。用Trizol法提取心房肌組織的總RNA，用逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)法測定心房肌L型-Ca2+通道和ca2+-ATPase mRNA含量。

7、 結果： 1、臨床資料的比較：各組患者的年齡、左心室內徑、左心室后壁厚度、室間隔厚度、心功能(左室射血分數(shù))無明顯的差別(P＞0.05)，但房顫組與陣發(fā)性房顫組的左心房內徑明顯大于竇性心律非瓣膜病組和或竇型性心律瓣膜病組(P＜0.05)，且慢性房顫組增大尤為明顯，竇性心律瓣膜病組的左心房內徑也較竇性心律非瓣膜病組大，但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。 2、各L-type Ca2+和SR Ca2+-ATPase蛋

8、白水平的改變：與竇性非瓣膜病組和竇性瓣膜病組比較，慢性房顫組L-type Ca2+/GAPDH和SRca2+-ATPase/GAPDH的蛋白比值在慢性房顫患者中較對照組下降，差異有統(tǒng)計學意義，其中，L-type Ca2+/GAPDH的下降在左右心房均p＜0.01，SR Ca2+-ATPase/GAPDH降低在左心房p＜0.01，而右心耳p＜0.05。陣發(fā)性房顫患者L-type Ca2+和sR Ca2+-ATPase蛋白表達與對照組比較亦

9、見降低，但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。二者在左右心房組織問表達一致，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。 3、各組L-type Ca2+和SR Ca2+-ATPase mRNA水平的改變： 與竇性非瓣膜病組和竇性瓣膜病組比較，慢性房顫組L-type Ca2+和SR Ca2+-ATPasemRNA水平下降，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01和＜0.05)，但在左右心房組織間表達一致，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；L-t

10、ype Ca2+和SR Ca2+-ATPase mRNA表達在陣發(fā)性房顫組患者中亦見降低，但未見有統(tǒng)計學意義的改變(P＞0.05)． 結論： 1、L-type Ca2+和sR Ca2+-ATPase的mRNA及蛋白含量在慢性房顫患者中均顯著下降。 2、L-type Ca2+和SR Ca2+-ATPase的mRNA及蛋白含量僅在慢性房顫患者中有顯著改變，陣發(fā)性房顫患者中無顯著改變。 3、左右心房組織L-ty