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1、目的:通過(guò)對(duì)椎問(wèn)盤纖維環(huán)細(xì)胞的培養(yǎng),細(xì)胞演變的觀察,研究椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞的生物學(xué)特性和退變機(jī)制,并為組織工程、基因治療等提供方法和體外模型,胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(IGF-1)對(duì)大鼠纖維環(huán)細(xì)胞體外增殖活性的影響,并觀察其量效和時(shí)效關(guān)系。 方法:體外分離培養(yǎng)大鼠纖維環(huán)細(xì)胞,將傳1代細(xì)胞種于96孔板,采用噻唑藍(lán)(MTT)比色法,觀察IGF-1在1%和10%血清濃度下對(duì)大鼠纖維環(huán)細(xì)胞體外增殖的調(diào)節(jié)作用及其劑量、時(shí)間與作用效果的關(guān)系,行H
2、E染色,甲苯胺藍(lán),免疫細(xì)胞化學(xué)染色分析細(xì)胞的生物學(xué)特性。 結(jié)果:原代纖維環(huán)細(xì)胞多為梭形,有偽足伸出,甲苯胺藍(lán)染色,胞漿染為深藍(lán)色,免疫細(xì)胞學(xué)方法檢測(cè)表明纖維環(huán)細(xì)胞有I型膠原表達(dá),在1%血清條件下,IGF-1的作用不顯著,在10%血清條件下,IGF-1能提高細(xì)胞的增殖活性,并且在有效濃度范圍內(nèi)呈劑量效應(yīng)關(guān)系。 結(jié)論 :GF-1能促進(jìn)大鼠纖維環(huán)細(xì)胞的體外增殖,其效應(yīng)在一定范圍內(nèi)與劑量和時(shí)間呈正相關(guān),本實(shí)驗(yàn)為椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞的
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