鐵皮石斛原球莖形態(tài)發(fā)甡NAC家族的生物信息學分析.pdf

1、鐵皮石斛(Dendrobium candidum Wall.ex Lindl.)是一種重要的蘭科植物，具有很高的藥用價值和觀賞價值，但人類過度采挖和破壞其生境，以及野生鐵皮石斛繁殖周期長，繁殖率低，致其淪為瀕危物種。本文以鐵皮石斛為材料，在果莢保存及種子萌發(fā)、原球莖發(fā)生形態(tài)學過程、原球莖發(fā)生細胞學過程和調控原球莖原分生組織形成的NAC基因生物信息學分析這四方面工作進行了研究，以期成為保護鐵皮石斛種質資源的重要手段，并對育種繁殖工作提供參

2、考。主要實驗結果如下:
　　(1)在不進行超低溫保存實驗情況下，果莢最優(yōu)的貯藏方式是表面消毒后置于4℃真空環(huán)境，可保存4個月，且種子萌發(fā)率可達90％以上。
　　(2)鐵皮石斛正常種子為黃綠色，呈兩端微尖的紡錘形，種皮中間有橢圓狀的種胚，由幾十個細胞組成。種皮為一層長形薄壁細胞，細胞透明，無內容物，其加厚環(huán)紋有一定的偏轉角度。紡錘形狀的種皮兩端不同，一端較細尖，另一端則比較鈍圓。種胚平均長度為180μm，寬度為120μm，種皮

3、長度為400μm，寬度為120μm，種胚和種子長度比為22.2％。
　　(3)在鐵皮石斛種子非共生培養(yǎng)過程中，25d左右突破種皮，原球莖頂端會出現一些綠色素積累，底端自胚內出現群體散射狀吸收毛。一周后發(fā)育成圓球形，40d左右原球莖的頂端出現凹陷，隨后凹陷處出現凸起并填滿凹陷，凸起持續(xù)發(fā)育成為子葉，子葉側翼再形成小溝，再歷時一個月逐漸發(fā)育成橢球形，并有真葉從子葉對側溝內長出，80d左右成為啞鈴形，原球莖底端逐漸降解，90d左右出現了

4、根，最后形成幼苗共需110d左右。
　　(4)原球莖縱橫比的變化趨勢主要受原球莖縱向和橫向細胞分裂生長速率的影響，45天后以原球莖長度增加為主。果莢中端的種子活力最強，接種時所需單個果莢的種子數量遠遠低于果莢內種子含量時，應盡量選取位于中端的種子。光照對處于圓球期及以前的原球莖發(fā)生無明顯影響，暗培養(yǎng)只延緩隨后的發(fā)生過程，并能增加原球莖長度。
　　(5)通過常規(guī)石蠟切片技術，以處于不同形態(tài)階段的原球莖為材料，研究了原球莖發(fā)生的