硫酸鋁鉀對體外培養(yǎng)的小鼠胚胎細胞增殖和分化的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察硫酸鋁鉀對體外培養(yǎng)的胚胎中腦神經細胞和肢芽細胞增殖、分化的影響，并探討其體外發(fā)育毒性特點，為揭示其致畸性及其作用機理提供實驗依據。 方法:根據Flint等提出的胚胎細胞微團培養(yǎng)方法，在本實驗室首次建立小鼠胚胎中腦神經細胞和肢芽細胞微團培養(yǎng)模型，并用陽性對照物維生素A驗證其可靠性。從12天齡小鼠胚胎中分離出中腦神經細胞和肢芽細胞，體外暴露于不同劑量的陽性對照物維生素A(終濃度分別為0.125、1.25、12.5、25.0

2、和50.0μg/ml培養(yǎng)液)和硫酸鋁鉀(A13+終濃度分別為0.1、1、2、4、8、10、20、40、80和100μmol/L培養(yǎng)液)，連續(xù)培養(yǎng)5天。5天后，根據噻唑藍(MTT)比色試驗和細胞集落形成抑制水平來反映維生素A、硫酸鋁鉀對體外培養(yǎng)的中腦神經細胞和肢芽細胞增殖、分化的影響。 結果:1.維生素A對體外培養(yǎng)的胚胎中腦神經細胞的增殖和分化均有抑制作用，并有明顯的劑量-效應關系(r=-0.915、r=-0.921，P＜0.05

3、)，其半數增殖抑制濃度(ICv50)和半數分化抑制濃度(ICd50)分別為13.1μg/ml、0.64μg/ml，與報道基本一致，證明所建方法可靠。 2.維生素A對體外培養(yǎng)的胚胎肢芽細胞的增殖和分化均有抑制作用，并有明顯的劑量-效應關系(r=-0.932、r=-0.947，P＜0.05)，其半數增殖抑制濃度(ICv50)和半數分化抑制濃度(ICd50)分別為5.1μg/ml、0.04μg/ml，與報道基本一致，證明所建方法可靠。

4、 3.不同劑量的硫酸鋁鉀對體外培養(yǎng)的胚胎中腦細胞的增殖和分化均有抑制作用，并有明顯的劑量-效應關系(r=-0.975、r=-0.936，P＜0.05)，其半數增殖抑制濃度(ICv50)和半數分化抑制濃度(ICd50)分別為43.75μmol/L、3.70μmol/L，V/D值為11.82。 4.不同劑量的硫酸鋁鉀對體外培養(yǎng)的胚胎肢芽細胞的增殖和分化也均有抑制作用，并有明顯的劑量-效應關系(r=-0.972、r=-0.92

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