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1、目的:探討組織工程肌腱種子細胞保存中檢測細胞存活率的方法.通過研究肌腱種子細胞深低溫保存過程中及保存前后等多個環(huán)節(jié)的影響因素對細胞存活率的影響,篩選抗凍保護劑、優(yōu)化凍存前后多個環(huán)節(jié)的影響因素以提高組織工程化肌腱種子細胞保存過程中的細胞存活率,為組織工程化肌腱保存作好準(zhǔn)備.最后對組織工程化肌腱保存作初步嘗試.結(jié)論:1.PI和Ho熒光染色后流式細胞儀分析及熒光攝影是種子細胞保存過程中細胞存活率研究的較好的方法.但要求細胞達到一定數(shù)量.2.凍
2、存后使用與培養(yǎng)時不同的營養(yǎng)血清處理對細胞有損害,可降低細胞存活率.3.二甲基亞砜是肌腱種子細胞深低溫保存中比較好的抗凍保護劑.34.在冷凍保存過程中,細胞存活率與細胞濃度有一定關(guān)系,濃度太低可能降低細胞存活率.5.細胞在冷凍保存時,降溫速度對細胞存活率有影響,慢速的分步降溫組細胞存活率明顯高于直接入液氮的快速降溫組.6.采用10﹪二甲基亞砜加15﹪小牛血清加75﹪DMEM配方保存肌腱種子細胞,對其分泌膠原功能無明顯影響.7.10﹪二甲基
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