大蒜素對脂多糖誘導(dǎo)人牙周膜成纖維細(xì)胞凋亡及IL-1β、TNF-α分泌的影響.pdf

1、目的:探討大蒜素對脂多糖(LPS)誘導(dǎo)人牙周膜成纖維細(xì)胞(hPDLCs)凋亡及分泌IL-1β、TNF-α的影響。
　　 方法:在組織貼壁法體外成功培養(yǎng)hPDLCs的基礎(chǔ)上
　　 1．利用MTT法檢測大蒜素和LPS對hPDLCs的抑制作用；采用AO/EB染色技術(shù)觀察大蒜素對LPS誘導(dǎo)hPDLCs凋亡的形態(tài)學(xué)改變；流式細(xì)胞術(shù)對凋亡細(xì)胞進行定量分析。
　　 2．ELISA技術(shù)檢測大蒜素對LPS誘導(dǎo)hPDLCs分泌IL-

2、1β、TNF-α的影響。
　　 結(jié)果
　　 1．當(dāng)LPS濃度為1μg/ml至100μg/ml時，隨著濃度的增長其抑制作用增大(P＜0.05)。大蒜素的各作用濃度均對hPDLCs有抑制作用，隨著大蒜素濃度的不斷增大其抑制作用增強(P＜0.05)。
　　 2．AO/EB染色觀察正常對照組中細(xì)胞形態(tài)正常，胞核及胞漿呈綠色；1μg/ml LPS組細(xì)胞核呈綠色，細(xì)胞質(zhì)為綠色略帶紅色，偶有細(xì)胞體積變圓，發(fā)出橘紅色熒光；LPS

3、與3μg/ml大蒜素共同作用時多數(shù)細(xì)胞呈綠色；LPS與6μg/ml大蒜素共同作用時多數(shù)細(xì)胞核呈綠色熒光，細(xì)胞質(zhì)為綠色略帶紅色；LPS與9μg/ml大蒜素共同作用時多數(shù)細(xì)胞變圓，發(fā)出橘紅色熒光。
　　 3．流式細(xì)胞定量分析顯示：與對照組相比，各大蒜素組細(xì)胞早期凋亡率和總凋亡率明顯增加(P＜0.05)。LPS組與對照組比較比較早、晚期及總凋亡率均增加(P＜0.05)。與LPS單獨作用hPDLCs比較，LPS與3μg/ml大蒜素共同作

4、用時總凋亡率降低(P＜0.05)；LPS與6μg/ml大蒜素共同作用時各凋亡率降低(P＞0.05)；LPS與9μg/ml大蒜素共同作用時晚期凋亡率和總凋亡率升高(P＜0.05)。
　　 4．ELISA結(jié)果顯示：各個實驗組與對照組比較，IL-1β與TNF-α分泌量明顯升高(P＜0.05)。LPS與大蒜素共同作用與LPS單獨作用比較，IL-1β與TNF-α分泌量降低(P＜0.05)。
　　 結(jié)論
　　 1．大蒜素和/