間充質(zhì)干細(xì)胞對肝衰竭的治療作用探討.pdf

1、暴發(fā)性肝衰竭(FHF)是一種急性的嚴(yán)重肝功能衰竭,病情兇險,預(yù)后極差,目前仍然是醫(yī)學(xué)上最難解、最棘手的癥候之一,在我國以常見的重型病毒性肝炎為典型代表,死亡率達(dá)到90％[1]。目前肝衰竭的治療手段主要有內(nèi)科藥物治療、人工肝治療和肝移植治療。內(nèi)科治療尚無特效藥且療效有限,肝移植因供體來源短缺、免疫排斥、移植費(fèi)用高等諸多因素的限制,人工肝其療效和安全性已經(jīng)得到一定程度的肯定,但肝細(xì)胞來源困難使國內(nèi)外生物人工肝研究都陷入了低谷。
　　近

2、年來,干細(xì)胞研究的快速發(fā)展為解決肝衰竭治療的細(xì)胞來源問題帶來了新的希望。MSCs最初在骨髓中發(fā)現(xiàn)[2-3],因其具有自我復(fù)制以及多向分化潛能、造血支持和促進(jìn)干細(xì)胞植入、免疫調(diào)控等特點(diǎn)而日益受到人們的關(guān)注,已經(jīng)被應(yīng)用于多種疾病的組織修復(fù)治療與研究中。因此采用干細(xì)胞移植來修復(fù)、治療急慢性肝衰竭患者,幫助病患度過危險期并等待肝移植或直接修復(fù)衰竭的肝臟是一個經(jīng)濟(jì)又理想的方法。
　　本課題以MSCs的多向分化潛能和已能分化為肝細(xì)胞的實(shí)驗為依

3、據(jù),以近年來的被證明的免疫調(diào)節(jié)功能為重要線索,以肝衰竭的免疫發(fā)病機(jī)制為基礎(chǔ),進(jìn)行以肝細(xì)胞和MSCs進(jìn)行二維共培養(yǎng)的實(shí)驗,設(shè)計在建立合理的細(xì)胞損傷和動物肝衰竭模型的基礎(chǔ)上,探索MSCs-肝細(xì)胞共培養(yǎng)上清對體外培養(yǎng)L02細(xì)胞的影響,以及MSCs-肝細(xì)胞共培養(yǎng)上清對肝衰竭動物的治療情況。研究結(jié)果顯示,共培養(yǎng)上清對L02有明顯的刺激增殖和損傷保護(hù)作用,表現(xiàn)為L02增殖活躍,總蛋白合成量增加;加入上述細(xì)胞上清的酒精損傷L02細(xì)胞AST、LDH釋放

4、和細(xì)胞凋亡顯著低于未加細(xì)胞上清的對照組。同時,動物實(shí)驗的結(jié)果也顯示 MSCs-肝細(xì)胞共培養(yǎng)上清能有效降低 KM小鼠的死亡率,有效改善大鼠的肝功能。共培養(yǎng)組的KM小鼠的死亡率為30%,明顯優(yōu)于單獨(dú)培養(yǎng)組,而對照組的小鼠的死亡率達(dá)到了80%。采用抗體陣列的方法對不同的細(xì)胞培養(yǎng)上清的成分進(jìn)行了初步鑒定,結(jié)果顯示 MSCs-肝細(xì)胞共培養(yǎng)上清中的IL-1、IL-6、IL-8等細(xì)胞因子的量明顯高于單獨(dú)培養(yǎng)的肝細(xì)胞上清、MSCs培養(yǎng)上清中的細(xì)胞因子的