沉默HepG2細胞內(nèi)源FNBP1基因表達誘導細胞形態(tài)重塑.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩46頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

1、目的:篩選FNBP1基因的有效siRNA片段,并轉(zhuǎn)入人肝癌細胞HepG2中,觀察FNBP1沉默后,HepG2細胞在形態(tài)、活力、周期等方面的變化。
　　 方法:運用基因芯片、RT-PCR、western blot驗證FNBP1在細胞中的存在；合成三組siRNA-FNBP1及陰性對照,轉(zhuǎn)染HepG2細胞,通過RT-PCR篩選最有效干擾片段；轉(zhuǎn)染經(jīng)篩選有效的siRNA片段,用RT-PCR和Western blot檢測siRNA-FNB

2、P1的干擾效率；通過HE染色、XTT、FCM觀察轉(zhuǎn)染siRNA-FNBP1后,HepG2細胞在形態(tài)、細胞活力及周期等方面的變化。
　　 結(jié)果:通過基因芯片、RT-PCR及Western blot驗證發(fā)現(xiàn),FNBP1在人類肝癌細胞HepG2中穩(wěn)定表達；通過篩選確定干擾效果最理想的siRNA序列為5’-CCCACUUCAUAUGUCGAAGUCUGUU-3’；干擾后RT-PCR及Western blot檢測表明,siRNA序列已將內(nèi)

3、源FNBP1基因的表達完全沉默。HepG2細胞在其內(nèi)源FNBP1基因表達被沉默后,細胞形態(tài)發(fā)生重塑,由上皮樣轉(zhuǎn)變?yōu)闃錉罘种Φ睦w維狀形態(tài)；而細胞活力和細胞周期無顯著變化。
　　 結(jié)論:利用RNA干擾技術(RNA interference technology,RNAi)沉默肝癌細胞HepG2內(nèi)源FNBP1基因表達以后,其細胞形態(tài)發(fā)生重塑,由上皮樣轉(zhuǎn)變?yōu)闃錉罘种Φ睦w維狀,表明FNBP1在細胞形態(tài)維持過程中亦具有不可或缺的潛在作用；根

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論