CTLA4Ig局部轉(zhuǎn)基因治療大鼠小腸移植急性排斥實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、一、大鼠同種異體在體異位節(jié)段小腸移植模型的建立.目的:為研究抗小腸移植排斥治療提供良好的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?方法:選用大鼠進(jìn)行同種異體異位節(jié)段性小腸移植.重建供腸血管采用腹主動(dòng)脈-腎下腹主動(dòng)脈吻合以及門靜脈-腎下下腔靜脈吻合.結(jié)論:該模型制作成功率較高、適合小腸移植排斥研究.二、大鼠移植腸局部CTLA4Ig基因轉(zhuǎn)染的可行性研究.目的:探討CTLA4Ig基因能否在移植小腸局部轉(zhuǎn)染表達(dá).方法:移植前經(jīng)腸系膜上動(dòng)脈給供腸灌注脂質(zhì)體包裹的CTLA4I

2、g cDNA重組質(zhì)粒,應(yīng)用免疫組織學(xué)及逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)觀察移植小腸中CTLA4Ig轉(zhuǎn)基因產(chǎn)物的表達(dá).結(jié)論:經(jīng)腸系膜上動(dòng)脈體外灌注脂質(zhì)體包裹的CTLA4Ig cDNA重組質(zhì)?？捎行мD(zhuǎn)染移植小腸.三、CTLA4Ig局部轉(zhuǎn)基因?qū)π∧c移植急性排斥的治療作用.目的:研究CTLA4Ig基因在移植小腸局部表達(dá)及其表達(dá)產(chǎn)物對(duì)急性排斥反應(yīng)的治療作用.方法:建立SD→Wistar的大鼠異位小腸移植模型,并隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組(CTLA4Ig轉(zhuǎn)基

3、因組)和對(duì)照組(非轉(zhuǎn)基因組).實(shí)驗(yàn)組供腸移植前經(jīng)腸系膜上動(dòng)脈注入脂質(zhì)體包襄的CTLA4Ig cDNA重組質(zhì)粒,術(shù)后應(yīng)用免疫組織學(xué)檢查移植小腸中CTLA4Ig轉(zhuǎn)基因產(chǎn)物的表達(dá).移植術(shù)后3,7,10d分別獲取各組的移植小腸進(jìn)行組織學(xué)檢查及細(xì)胞凋亡測(cè)定.結(jié)論:CTLA4Ig基因可在移植小腸局部轉(zhuǎn)染表達(dá),其表達(dá)產(chǎn)物可防止移植術(shù)后急性排斥反應(yīng)的發(fā)生.四、移植腸局部CTLA4Ig轉(zhuǎn)基因?qū)κ荏w免疫排斥反應(yīng)的影響.目的:研究CTLA4Ig基因在小腸局部

4、轉(zhuǎn)染表達(dá)及其表達(dá)產(chǎn)物對(duì)受體免疫排斥反應(yīng)的影響.方法:移植前經(jīng)腸系膜上動(dòng)脈給供腸灌注脂質(zhì)體包裹的CTLA4Ig cDNA重組質(zhì)粒,應(yīng)用免疫組織學(xué)及逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)檢測(cè)移植小腸中CTLA4Ig轉(zhuǎn)基因產(chǎn)物的表達(dá),并觀察受體對(duì)供腸及供者同系鼠皮膚移植的排斥反應(yīng).結(jié)論:經(jīng)腸系膜上動(dòng)脈體外灌注脂質(zhì)體包裹的CTLA4Ig cDNA可有效轉(zhuǎn)染移植小腸,并誘導(dǎo)受體對(duì)移植小腸的免疫耐受,但移植腸局部CTLA4Ig基因轉(zhuǎn)染不能誘導(dǎo)出供者特異的外周耐受狀態(tài).