山東漢族人群IL-12B基因和ADAM33基因多態(tài)性與慢性阻塞性肺病的相關性研究.pdf

1、人體內的IL-12主要由抗原遞呈細胞（如單核細胞和巨噬細胞、樹突狀細胞）及B細胞產生，是一種重要的致炎細胞因子，分子量為70KD，由40KD（p40）和35KD（p35）兩條多肽鏈組成。最近有研究發(fā)現IFN-γ可能誘導細胞趨化因子CXCL10的表達，抑制分泌型白細胞蛋白酶抑制劑的產生，促進慢性阻塞性肺?。–OPD）氣道炎癥和肺氣腫的過程。而IFN-γ可促進IL-12的產生，兩者之間可通過正反饋途徑，在調節(jié)Th亞群分化上產生協同作用。IL

2、-12B位于染色體5q31-q33，編碼p40，全長16kb，在遺傳學研究中發(fā)現該染色體區(qū)域與某些呼吸系統(tǒng)疾病存在相關性。ADAM33是近年來新發(fā)現的解整合素-金屬蛋白酶（ADAM）家族成員之一。ADAM33定位于第20號染色體短臂13號位（20 p13），主要與氣道上皮細胞損傷后的修復有關，此基因主要在肺的平滑肌細胞、成肌纖維細胞和成纖維細胞表達。在氣道上皮細胞、炎性細胞及免疫細胞中不表達。當ADAM33活性改變時，可能引起氣道平滑肌

3、細胞和成纖維細胞的功能改變，因此認為ADAM33基因可能與小氣道重塑，氣道高反應性及炎癥等有關。因此，IL-12B基因及ADAM33基因對COPD的發(fā)生發(fā)展可能起了重要的作用，但是目前在山東漢族人群內尚未有IL-12B基因及ADAM33基因多態(tài)性與COPD的相關性進行的研究。 [研究目的]： 利用病例-對照研究方法探討IL-12B基因及ADAM33基因多態(tài)性與山東漢族人群慢性阻塞性肺病之間的相關性，尋找山東漢族人群COP

4、D發(fā)病的易感基因，為COPD高危人群的篩選、早期預防和臨床治療提供理論依據。 [研究方法]： 1.COPD組與對照組樣本收集：在山東漢族人群中收集COPD患者及正常對照血樣并提取基因組DNA。所收集的COPD患者均符合中華醫(yī)學會呼吸病學分會2007年制訂的慢性阻塞性肺病診斷標準；同期健康體檢者作為對照組。所有受試對象均排除支氣管擴張、肺結核、肺部腫塊、肺間質纖維化、胸部手術等呼吸系統(tǒng)病史及心臟病等其他疾病，經過詳細的病史

5、調查和體格檢查，并進行胸部X檢查和肺功能測定。 2.基因分型，基因型及等位基因頻率統(tǒng)計：利用適宜的基因分型方法在COPD組與對照組所有個體中對多態(tài)位點進行基因型分析，并采用了聚合酶鏈式反應-限制性片段長度多態(tài)（PCR-RFLP）方法對IL-12B基因1188A/C位點及ADAM33基因T1位點進行分型。根據瓊脂糖凝膠電泳結果確定個體基因型，統(tǒng)計出病例組與對照組中的基因型頻率及等位基因頻率。 3.Hardy-Weinber

6、g平衡吻合度檢驗：根據Hardy-Weinberg平衡定律計算多態(tài)位點在COPD組和對照組中的預期基因型頻率，利用卡方檢驗比較觀察到的基因型頻率與預期基因型頻率間的差異，以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。以確定所選取的COPD組與對照組樣本是否具有群體代表性。 4.基因型與等位基因分布差異檢測：利用卡方檢驗比較各多態(tài)位點在COPD組與對照組間的基因型頻率及等位基因頻率差異，以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。若多態(tài)位點的基

7、因型頻率及等位基因頻率在組間具有統(tǒng)計學差異，說明該多態(tài)位點與COPD具有相關性，反之則無相關性。 [結果]： 1.IL-12B基因1188A/C多態(tài)位點AA、AC、CC基因型頻率在病例組中分別為0.3333、0.4784和0.1883，在對照組中分別為0.3573、0.4756和0.1671，A和C等位基因型的頻率在病例組中分別為0.5725和0.4275，在對照組分別為0.5951和0.4049，該位點基因型和等位基因

8、型分布在病例組與對照組P值分別為0.689，0.389，差異均無統(tǒng)計學意義。 2.ADAM33基因T1位點在中國山東漢族人群中具有多態(tài)性，在COPD組與對照組中處于遺傳平衡狀態(tài)，其基因型、等位基因頻率在COPD組與對照組間差異無統(tǒng)計學意義（P=0.117，P=0.090）。 [結論]： 1.IL-12B基因1188A/C位點多態(tài)與山東漢族人群慢性阻塞性肺病無相關性。 2.ADAM33基因T1位點與中國山東