46,XY女性性逆轉患者的SF-1基因分析研究.pdf

1、背景與目的:
　　 性逆轉綜合征是一種由于性別決定和分化異常導致的兩性畸形,其主要特征是患者的核型與表型相反,分為46,XX男性和46,XY女性兩型。目前對于性腺分化的分子機制、信號途徑了解還很不夠,對人類性腺分化的遺傳調控的了解,也是問題遠多于答案。通過遺傳分析性逆轉患者來研究胚胎性腺發(fā)育和分化等相關基因是一條比較便捷的通道。SF-1(又名NR5A1,FTZ-F1,Ad4BP)是核受體家族的一員,調節(jié)多數(shù)性腺發(fā)育和生殖基因,是

2、和下丘腦-腦垂體-生成類固醇軸相關的關鍵轉錄調節(jié)基因。SF-1基因敲除老鼠展示了完全的腎上腺和性腺發(fā)育不全。隨著在XY性腺發(fā)育不全和原發(fā)卵巢功能不全中不斷發(fā)現(xiàn)的SF-1基因突變充分說明了SF-1在腎上腺和性腺功能的操控和維護中起到了關鍵的作用。因而SF-1是引起合并或無腎上腺衰竭的46,XY性腺發(fā)育障礙的原因。本實驗通過測序分析XY女性性逆轉患者的SF-1基因突變情況來進一步認證SF-1與XY女性性逆轉的相關性。
　　 方法:<

3、br>　　 收集2007年1月至2009年9月到我院就診的女性臨床表型但染色體核型卻為46,XY的性逆轉患者的EDTA抗凝全血和血清樣本6例。首先檢測血清性激素系列和皮質醇,然后抽提DNA,再根據(jù)SF-1的2～7外顯子的序列設計的引物進行聚合酶鏈反應(PCR)反應。最后對PCR產物直接測序分析以及對PCR產物檢出的突變進行連接質粒后再測序和限制性內切酶分析的驗證突變分析。針對未見報道的新突變,篩查110名表型和核型一致的無關個體,排除

4、多態(tài)的可能。
　　 結果:
　　 在樣本4的Exon4中檢出了一個的新的突變(p.V128A)和一個報道過的多態(tài)突變(p.G146A)。樣本1中也檢出了一個和樣本4相同的多態(tài)突變。P.V128A在110例正常對照人群中未發(fā)現(xiàn)相同的突變,p.G146A在正常對照人群中檢出了37.3％的突變率。6例樣本中除了樣本2的皮質醇低于正常值提示可能合并有腎上腺功能不全外,其余樣本腎上腺功能均正常。
　　 結論: