TLR4及NF-kBp65在食管癌組織中的表達及其臨床意義.pdf

1、食管癌是消化道常見的惡性腫瘤,每年患食管癌死亡人數(shù)約占我國腫瘤死亡人數(shù)的25％,其5年生存率<10％,居癌癥死因第4位。目前對食管癌病因的研究發(fā)現(xiàn)除了吸煙飲酒、微量元素的缺乏、亞硝胺及亞硝酸鹽等因素外,幽門螺旋桿菌(HP)等生物病原體感染引起的持續(xù)性炎癥以及胃酸、膽汁的長期返流造成的慢性損傷對食管癌形成也有著重要影響。大量研究證實長期炎癥刺激與腫瘤的發(fā)生有著密切的關系,但機制至今仍未得到明確闡述,推測可能為:當機體遇病原體入侵或損傷修復

2、時,免疫系統(tǒng)會被激活,進而趨化大量炎癥細胞聚集至損傷部位,后分泌多種細胞因子(包括炎癥因子、趨化因子、黏附分子)與細胞外基質在局部形成新的微環(huán)境,在此環(huán)境中細胞因子、趨化因子的持續(xù)存在和由其引發(fā)的級聯(lián)反應能夠誘導細胞增殖,同時炎癥介質的長期存在又增加了活性氧產(chǎn)物的產(chǎn)生,導致了DNA氧化損傷,有DNA損傷的增殖細胞在富含炎癥細胞和多種生物因子的微環(huán)境中繼續(xù)失控性增殖,最終導致癌變。目前研究發(fā)現(xiàn)TLRs(toll-likereceptors

3、)介導的信號轉導通路在腫瘤形成過程中起著重要作用。TLRs與相應配體結合后可啟動經(jīng)典的NF-κB信號通路,產(chǎn)生多種細胞因子,形成適合腫瘤生長的微環(huán)境,促進癌癥的發(fā)生發(fā)展。
　　 Toll樣受體是近年來發(fā)現(xiàn)的免疫受體,它通過識別病原體在機體的免疫防御中起重要作用。TLR4是人類發(fā)現(xiàn)的第一個TLR相關蛋白,是目前發(fā)現(xiàn)與腫瘤發(fā)病關系較密切的TLR家族成員。TLR4的主要配體是革蘭氏陰性細菌的細胞壁成分內毒素／LPS。除此之外,TLR4

4、還有很多內源性配體,如呼吸道合胞病毒蛋白F、分枝桿菌成分、熱休克蛋白、飽和與不飽和脂肪酸、透明質酸片段、表面活性蛋白A等。TLR4活化的信號轉導通路屬于經(jīng)典的依賴MyD88的信號轉導通路,可啟動NF-κB途徑和應激激酶途徑,啟動炎癥因子如YNF-α、IL-1、IL-6和IL-8等的基因轉錄,最終釋放大量的細胞因子及炎癥趨化因子。有研究報道TLR4和NF-κBp65在胃癌、大腸癌、胰腺癌、肝癌等消化道腫瘤組織中都有陽性表達,但其在食管癌組

5、織中是否也有表達及其意義目前尚無相關研究及報道。
　　 目的:
　　 本實驗旨在從蛋白水平研究TLR4及其信號轉導通路中的關鍵因子NF-κBp65在食管癌組織中的表達情況,分析TLR4、NF-κBp65與腫瘤細胞分化程度、淋巴結轉移等臨床病理資料的相關性,探討TLR4-NF-κB信號轉導通路與食管癌的發(fā)生、發(fā)展是否存在聯(lián)系及其臨床意義。
　　 方法:
　　 本研究用免疫組化法(2步法)檢測30例食管鱗癌組

6、織及20例食管正常組織的TLR4及NF-κB p65的表達,并結合腫瘤的病理生理學行為進行分析。標本均經(jīng)病理證實為食管鱗癌或食管正常組織。實驗結果采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行X2驗及Spearman等級相關分析。所有資料間差別均以P值來表示,檢驗水平α=0.05,P<0.05表示有統(tǒng)計學意義。
　　 結果:
　　 1、TLR4蛋白在食管癌組織和正常食管黏膜組織中的陽性表達率分別為43.3％(13／30)、10％(2／

7、20)；NF-κB p65蛋白在食管癌組織和正常食管黏膜組織中的陽性表達率分別為56.7％(17／30)、25％(5／20)。
　　 2、在食管癌組織中,TLR4和NF-κBp65的陽性表達率均明顯高于正常食管黏膜組織中的陽性表達率,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 3、TLR4及NF-κBp65的陽性表達率均與食管癌患者的年齡、性別及腫瘤在食管的部位無關(P>0.05)。
　　 4、TLR4及NF-κB

8、p65的陽性表達與腫瘤的分化程度呈負相關,分化低者表達越高,TLR4及NF-κB p65與腫瘤分化程度的相關系數(shù)分別為r=-0.522(P=0.003)和r=-0.522(P=0.005)。
　　 5、NF-κBp65的陽性表達與淋巴結轉移有關,有轉移者NF-κBp65蛋白的表達率高于無轉移者(X2=5.436,P<0.05)。
　　 6、TLR4與NF-κBp65在食管癌組織中的表達存在正相關關系(r=0.426,P=

9、0.019)。
　　 結論:
　　 1、TLR4與NF-κBp65在食管癌中呈高水平表達,且兩者的表達均與食管癌的分化程度呈負相關,說明兩者與食管癌發(fā)生發(fā)展及惡性程度有一定關系。另外,NF-κB p65的表達與淋巴結轉移有關,說明其在腫瘤細胞的遷徙、轉移中有一定的作用。
　　 2、TLR4與NF-κBp65兩種蛋白的表達強度之間呈正相關,提示二者可能在促進食管癌的發(fā)生發(fā)展中存在一定依存性,對其分子通路的進一步研究