重組人干擾素-ω在體內(nèi)外對腫瘤細胞影響的實驗研究.pdf

1、目的：研究重組人干擾素-ω對腫瘤細胞的影響，篩選對干擾素-ω敏感的腫瘤細胞株，估價干擾素-ω在體內(nèi)、外對人腫瘤細胞生長及轉(zhuǎn)移的抑制作用，并初步探討其抗腫瘤作用的機制。比較干擾素-ω與干擾素-α抗腫瘤特性的異同點，確定是否可以作為干擾素-α的一種替代或優(yōu)化產(chǎn)品。方法：體外培養(yǎng)各種人腫瘤細胞株(乳腺癌、肺癌、肝癌、前列腺癌、黑色素瘤、白血病、胃癌、結(jié)腸癌)，加入本室自行研制的基因工程人干擾素-ω或市售的干擾素-α，作用濃度從100-2000

2、U/ml，選出可以發(fā)揮作用的最低濃度，MTT法檢測干擾素對腫瘤細胞增殖的影響；明膠酶譜法檢測細胞基質(zhì)金屬蛋白酶的分泌；利用Boyden小室檢測腫瘤細胞的侵襲能力。選擇體外研究中對干擾素-ω及α敏感的人肝癌細胞系HepG2細胞作為體內(nèi)研究的對象，106皮下接種于BALB/C裸鼠，干擾素瘤旁1cm內(nèi)10萬單位隔天皮下注射作為實驗組，PBS作為對照組，隔天測量瘤體的大?。?周后小鼠處死取生長的瘤塊及近處淋巴結(jié)、肝、肺、脾等臟器甲醛固定，HE染

3、色觀察腫瘤細胞向附近淋巴結(jié)及其它臟器的轉(zhuǎn)移情況，免疫組化法檢測生長腫瘤組織細胞增殖核抗原PCNA的表達；TUNEL法檢測腫瘤細胞的凋亡。結(jié)果：人干擾素-ω及α可以抑制某些腫瘤細胞株(如肝癌細胞系HepG2、前列腺癌細胞系PC3、肺癌細胞系LH7、BE1、白血病細胞系K562等)的增殖，抑制率從11.2％-29.9％；低劑量的干擾素-ω及α(500U/ml)即有抗腫瘤細胞增殖的作用?；|(zhì)金屬蛋白酶作為一種細胞外基質(zhì)蛋白的分解酶而參與細胞的

4、遷移和侵襲，與腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移十分相關(guān)。明膠酶譜法檢測發(fā)現(xiàn)干擾素-ω及α對所檢測的12種腫瘤細胞株細胞基質(zhì)金屬蛋白酶的分泌沒有影響。Boyden小室檢測干擾素-ω及α對人肝癌細胞系HepG2細胞侵襲能力有明顯的抑制作用；干擾素-ω及α治療組荷瘤小鼠腫瘤體積明顯小于對照組；HE染色顯示HepG2細胞可以向近側(cè)腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，兩組未見差異，未發(fā)現(xiàn)有其它臟器的轉(zhuǎn)移；干擾素-ω組裸鼠生長腫瘤PCNA表達明顯低于對照組；腫瘤細胞的凋亡明顯增加。結(jié)論