莪術(shù)醇誘導(dǎo)胃癌SGC-7901細胞凋亡的實驗研究.pdf

1、目的： 通過檢測莪術(shù)醇處理的胃癌SGC-7901細胞增殖的抑制率，細胞的形態(tài)學(xué)變化，DNA變化，以及凋亡抑制蛋白Bcl-2的表達，探討莪術(shù)醇對胃癌SGC-7901細胞凋亡的誘導(dǎo)作用，初步闡明莪術(shù)醇的抗腫瘤機制，為莪術(shù)醇抗腫瘤的臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。 研究對象： 胃癌SGC-7901細胞株。 方法： 將莪術(shù)醇溶于無水乙醇，初始濃度為5mg/mL。設(shè)實驗組A、B、C、D組，按比例濃度配制的12.5、2

2、5、50、100μg/mL莪術(shù)醇培養(yǎng)基，并以含1％無水乙醇培養(yǎng)基為陰性對照組E。采用MTT法和alamarblue法檢測12.5-100μg/mL四種不同濃度莪術(shù)醇作用SGC-7901細胞24、48、72h后細胞增殖的抑制率；采用AO/EB熒光染色法觀察莪術(shù)醇處理SGC-7901細胞24、48、72h后細胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化；采用PI標記流式細胞術(shù)檢測莪術(shù)醇處理SGC-7901細胞24、48h的凋亡率；采用WesternBlot檢測莪術(shù)醇

3、處理SGC-7901細胞24、48h后凋亡抑制蛋白Bcl-2的表達。 結(jié)果： 1、MTT法檢測提示：12.5-100μg/mL莪術(shù)醇可以抑制細胞增殖，莪術(shù)醇對細胞增殖的抑制作用隨莪術(shù)醇濃度增加和作用時間延長(除了12.5μg/mL莪術(shù)醇處理SGC-7901細胞24、48、72h，三個時間段的抑制率之間無顯著性差異(P＞0.05))而逐漸增強，加藥組的抑制率與對照組比較，有顯著性差異(P＜0.05)。 2、alam

4、arblue法檢測提示：12.5-100μg/mL莪術(shù)醇可以抑制細胞增殖，莪術(shù)醇對細胞增殖的抑制作用隨莪術(shù)醇濃度增加和作用時間延長(除了12.5μg/mL莪術(shù)醇處理SGC-7901細胞24、48、72h，三個時間段的抑制率之間無顯著性差異(P＞0.05))而逐漸增強，加藥組抑制率與對照組比較，有顯著性差異(P＜0.05)。 3、AO/EB熒光染色法觀察：12.5-100μg/mL莪術(shù)醇可以誘導(dǎo)SGC-7901細胞凋亡，莪術(shù)醇處理

5、細胞24、48、72h，凋亡細胞數(shù)隨莪術(shù)醇濃度增加和作用時間延長(除了12.5μg/mL莪術(shù)醇處理SGC-7901細胞24、48、72h，三個時間段的凋亡率之間無顯著性差異(P＞0.05))而逐漸增多，加藥組的凋亡率與對照組比較，有顯著性差異(P＜0.05)。 4、流式細胞術(shù)顯示：12.5-100μg/mL莪術(shù)醇促進SGC-7901細胞凋亡，莪術(shù)醇作用SGC-7901細胞24、48h，凋亡率隨莪術(shù)醇濃度增加和作用時間延長而逐漸增

6、高，加藥組的凋亡率與對照組比較，有顯著性差異(P＜0.05)。 5、WesternBlot結(jié)果顯示：12.5-100μg/mL莪術(shù)醇可以降低SGC-7901細胞Bcl-2蛋白的表達，莪術(shù)醇處理SGC-7901細胞24、48h，Bcl-2蛋白表達的相對含量隨莪術(shù)醇濃度增加和作用時間延長而逐漸降低，加藥組與對照組Bcl-2蛋白表達的相對含量比較，有顯著性差異(P＜0.05)。 結(jié)論： 1、濃度為12.5-100μg/