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文檔簡介
1、[目的]
探討Pygo2對人腎細胞癌OS-RC-2細胞系成瘤的影響,為體內(nèi)研究腎癌發(fā)病機制及靶向治療提供工具。
[方法]
采用人腎癌癌OS-RC-2細胞株,對其細胞中的Pygo2經(jīng)過一系列不同處理,然后分組建立裸鼠皮下移植瘤模型。MTT法觀察OS-RC-2細胞生長情況。將裸鼠分成四組,每組四只,分別用處理過的四種腎癌細胞懸液,分別為A組:實驗對照組GFP(原始細胞)、B組:空白對照組Pygo2scrRNA(
2、植入空白載體)、C組:過表達組Pygo2OE,D組:沉默組Pygo2shRNA(利用基因敲除技術使Pygo2低表達)。將4.0x106腎細胞癌細胞懸液0.2ml種植于裸鼠右前腋窩下。定期觀察各組成瘤情況。免疫組化實驗測定各組腫瘤組織的侵襲性蛋白(MMP-9、MMP-7和VEGF)表達。
[結果]
第2天細胞進入對數(shù)生長期。A、B、C組成瘤率均為100%,D組成瘤率為75%。Pygo2OE組于第3天可見黃豆粒大小移植瘤
3、,第7天,GFP和Pygo2scrRNA組觸及皮下小結,Pygo2shRNA于第10才出現(xiàn)移植瘤。C組的成瘤速度明顯優(yōu)于其他三組(P﹤0.05)。D組的成瘤速度及成瘤率均低于其他組(P﹤0.05)。免疫組化實驗研究表明Pygo2shRNA能夠顯著減少MMP-7和VEGF的表達,與減少MMP-7和VEGF的表達量相比較,Pygo2shRNA不能明顯減少MMP-9的表達量。
[結論]
使用OS-RC-2細胞株對其Pygo
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