山葡萄性別相關分子標記的篩選及性別決定基因的初步研究.pdf

1、山葡萄是葡萄屬中最抗寒的一個種，對多種歐亞種群易感的病害都有較強的抵抗力。它是目前國內外葡萄抗寒和抗病育種的主要種質資源。而野生山葡萄一般為雌雄異株，兩性花類型極為罕見。本研究利用AFLP分子標記技術，研究與山葡萄性別相關的分子標記，同時將其轉化為簡單實用的scAR標記，以實現葡萄性別的早期鑒定，加快葡萄育種進程。由于葡萄的性別是由性別基因決定，因此研究葡萄雌雄植株之間表達差異的基因，為進一步研究山葡萄的性別決定和分化機制提供理論依據，

2、為克隆其性別相關基因奠定基礎。本研究取得了以下主要結果： 通過構建山葡萄雌花、雄花和完全花基因池方法與AFLP技術相結合，利用64對引物對三個基因池進行擴增，篩選到五對具有多態(tài)性的引物，利用這五對引物對組池個體進行擴增，結果發(fā)現只有引物E-AGC/M-CTG與山葡萄性別相關，利用該引物對其它已知性別的14份山葡萄種質資源進行驗證，發(fā)現該引物在供試的雄花和完全花中能產生特異性條帶，而雌花中沒有該特異性條帶出現，初步證明該AFLP標

3、記與山葡萄性別相關。 根據AFLP標記片段序列設計特異性引物，在已知性別的85份山葡萄種質中進行擴增，發(fā)現在所有的雄花和完全花中都能擴增出人小為220bp的特異性條帶，而供試的55份雌花中，53份沒有出現該特異性條帶，準確率為97.6％，證明該AFLP標記成功轉換為SCAR標記，并且可以用于以山葡萄作為親本的雜交后代性別的早期鑒定。 建立了山葡萄cDNA-AFLP體系，利用該體系研究山葡萄雌雄花問差異表達的基因，共篩選了