肺癌患者血清CK19-2G2、CEA、NSE的聯(lián)合檢測(cè)及其臨床意義.pdf

1、背景與目的:近年來(lái)我國(guó)癌癥發(fā)病率逐年高升，其中特別是肺癌。雖然近年來(lái)在肺癌的治療方面我們已取得了較大進(jìn)步，但其病死率仍高居不下。究其原因，主要是臨床發(fā)現(xiàn)和治療較晚，一般發(fā)現(xiàn)和治療的肺癌患者多為中晚期患者，早期肺癌患者相對(duì)較少。在生存率方面，中晚期肺癌患者術(shù)后的5年生存率(30％～40％)遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于早期肺癌患者（高達(dá)70％）。因此要想提高肺癌的治療效果，我們必須采取有效措施來(lái)大力開展早期肺癌的診斷和治療。然而目前早期肺癌的診斷還極為困難，其

2、發(fā)現(xiàn)一般是在胸部X線檢查過(guò)程中。隨著肺癌發(fā)病機(jī)理研究的不斷深入，人們逐漸意識(shí)到，肺癌的發(fā)病過(guò)程及發(fā)病機(jī)理相當(dāng)復(fù)雜，涉及多種誘發(fā)因素、多個(gè)階段并且分子生物學(xué)（如癌基因、抑癌基因等）和分子遺傳方面也發(fā)生了諸多改變，這意味著其中可能存在用于檢測(cè)早期癌變的標(biāo)志物。
　　 目前的血清標(biāo)志物檢測(cè)簡(jiǎn)單且基本無(wú)創(chuàng)，可使用細(xì)胞角蛋白(cytokeratin，CK)、CEA、NSE等作為抗體。CK種類繁多，已知的就有20多種，但CK只有被降解為較短

3、、可溶的片段后才可釋放入血，因此血清學(xué)檢測(cè)中的CK抗體只限于特定種類或某些片段。最近一些研究發(fā)現(xiàn):新的CK19降解片段CK19-2G2在諸多惡性腫瘤組織中均呈過(guò)度表達(dá)，這意味著其可能在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起重要作用，因此通過(guò)檢測(cè)肺癌患者血清中CK19-2G2的表達(dá)水平，可有助于我們發(fā)現(xiàn)其在肺癌輔助診斷中的價(jià)值。相關(guān)研究指出，CK19-2G2在肺鱗癌患者的陽(yáng)性檢出率均顯著高于肺腺癌和肺小細(xì)胞肺癌患者，單一腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)早期肺癌的靈敏度還不

4、夠理想，因此多種腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合檢測(cè)就成為應(yīng)對(duì)之策。
　　 CEA是一種廣譜的腫瘤標(biāo)記物。肺癌患者血清中，CEA的水平明顯高于良性肺部疾病組患者和正常人，其中腺癌中CEA陽(yáng)性率最高，高達(dá)70％以上。此外，血清中的CEA水平同TNM分期呈正相關(guān)，TNM分期越高，血清中的CEA水平也越高。CEA陽(yáng)性對(duì)判斷肺癌患者預(yù)后有重要作用，是肺癌復(fù)發(fā)的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素，CEA升高的肺癌患者其預(yù)后差。但CEA有較高的假陽(yáng)性和假陰性，這使它的應(yīng)用受到一

5、定限制。
　　 NSE存在于神經(jīng)及神經(jīng)來(lái)源的細(xì)胞中，起源于神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞的腫瘤組織的異常表達(dá)，其在正常腦組織中含量最高。而小細(xì)胞肺癌正是具有神經(jīng)分泌性質(zhì)的腫瘤，故NSE是診斷小細(xì)胞性肺癌最敏感、最特異的腫瘤標(biāo)記物。不同組織類型的肺癌組織和血清中，NSE的含量有較大差異，其含量由高到低依次為SCLC、大細(xì)胞癌、鱗癌和腺癌。由于NSE診斷小細(xì)胞肺癌的敏感性、特異性均很高，因此其可用于輔助診斷、鑒別診斷及對(duì)病情的療效估計(jì)。
　　

6、 鑒于單一腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)在敏感性、特異性等方面的局限性，本實(shí)驗(yàn)擬聯(lián)合檢測(cè)肺癌患者血清CK19-2G2、CEA、NSE的表達(dá)，以期待提高診斷早期肺癌的靈敏度。
　　 方法:選取的實(shí)驗(yàn)樣本共分為肺癌組、良性組和對(duì)照組三組。其中肺癌組患者共120例，均為2011年6月至2012年10月山東省腫瘤醫(yī)院胸外科收治的肺癌患者且均經(jīng)細(xì)胞學(xué)或病理學(xué)檢查并確診。其中男性患者75例、女性患者為45例;年齡分布為35～75歲不等，平均年齡為55歲。

7、所有患者術(shù)前檢查時(shí)，均未發(fā)現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及其它系統(tǒng)嚴(yán)重合并癥，術(shù)前均未行抗腫瘤治療且無(wú)手術(shù)禁忌癥。術(shù)后病理結(jié)果顯示:鱗癌患者58例、腺癌46例、小細(xì)胞肺癌16例（檢測(cè)為其它病理類型的未入組）。此外，我們選取60例肺部良性疾病患者作為良性組，這些患者均經(jīng)CT或MRI等影像學(xué)確診。具體情況為:男性患者40例，女性患者20例;年齡分布為22～76歲，平均年齡為48歲。除良性組外，我們還選取30例健康體檢者（男性16例，女性14例）作為對(duì)照組，年齡

8、自27～73歲不等，平均年齡為50歲。
　　 實(shí)驗(yàn)前，上述三組中所有入組對(duì)象均知情并同意。實(shí)驗(yàn)時(shí)，采集患者術(shù)前清晨空腹靜脈血3-4ml，用專門的離心機(jī)離心后取血清，置于-20℃環(huán)境下冷凍保存待測(cè)。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)上述三組中所有對(duì)象（120例肺癌患者、60例良性組、30例正常對(duì)照組）血清中CK19-2G2的濃度并由此檢測(cè)CK19-2G2診斷肺癌的敏感性及特異性等指標(biāo);同時(shí)采用電化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)120例肺癌患者

9、血清中的CEA和NSE含量，并同CK19-2G2進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較分析，以此來(lái)探討CK19-2G2、CEA、NSE聯(lián)合檢測(cè)在肺癌輔助診斷中的價(jià)值。
　　 結(jié)果:
　　 (1)120例肺癌組患者血清中CK19-2G2含量為(7.56±1.66) mU/ml，正常對(duì)照組相應(yīng)的CK19-2G2含量為(0.42±0.24) mU/ml，兩者之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著意義(P＜0.01);肺癌患者血清中CEA含量為(14.78±3.0

10、4) mU/ml，正常對(duì)照組相應(yīng)的含量為(1.01±0.47) mU/ml，兩者之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著意義(P＜0.01);肺癌患者血清中NSE含量為(14.03±6.52) mU/ml，正常對(duì)照組相應(yīng)的含量為(5.52±1.24) ngU/ml，兩者之間的差異也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著意義(P＜0.01)。
　　 (2)肺癌患者血清中CK19-2G2水平與腫瘤大小、病理類型及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等因素相關(guān)(P＜0.05)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯

11、著意義;而與性別、年齡等因素?zé)o關(guān)(P＞0.05)。
　　 (3)若選擇正常對(duì)照組血清中CK19-2G2濃度的95％置信區(qū)間的上限值(2.14mU/ml)為界值，并規(guī)定濃度高于此值時(shí)判為陽(yáng)性，反之為陰性，結(jié)果顯示:120例肺癌組患者血清中CK19-2G2的陽(yáng)性率為60.0％(72/120)，而正常對(duì)照組血清相應(yīng)的陽(yáng)性率僅為6.7％(2/30)，兩者之間的差異非常顯著(P＜0.01)。 CEA和NSE的醫(yī)學(xué)參考值以試劑盒的建議為標(biāo)準(zhǔn)

12、，其中CEA＞5ng/ml，NSE＞1Tng/ml，高于此參考值者為陽(yáng)性，反之則為陰性。結(jié)果顯示:120例肺癌組患者血清中CEA和NSE的陽(yáng)性率分別為41.7％(50/120)和47.3(19/120)，而正常對(duì)照組血清相應(yīng)的陽(yáng)性率分別僅為3.3％(1/30)和3.3％(1/30)，兩者之間的差異均也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著意義(P＜0.01、P＜0.01)。
　　 此外，肺癌患者血清中CK19-2G2、 CEA和NSE的表達(dá)水平同腫

13、瘤的病理類型具有相關(guān)性。具體來(lái)說(shuō)，同一腫瘤標(biāo)志物在不同類型腫瘤中的分布不同。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，CK19-2G2在肺鱗癌患者陽(yáng)性率較高(相比較于腺癌和小細(xì)胞肺癌組，結(jié)果均非常顯著，P＜0.01、P＜0.01);CEA在腺癌組中陽(yáng)性率較高（相比較于鱗癌和小細(xì)胞肺癌組，結(jié)果均非常顯著，P＜0.01、P＜0.01）;NSE在小細(xì)胞癌組中陽(yáng)性率較高（相比較于鱗癌和腺癌組，結(jié)果均非常顯著，P＜0.01、P＜0.01）。
　　 (4)將CK19-

14、2G2的檢測(cè)結(jié)果與CEA、NSE檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較分析，結(jié)果表明:CK19-2G2、CEA和NSE診斷肺癌的敏感性分別為56.4％、41.7％和15.8％，其中CK19-2G2診斷肺癌的敏感性遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于CEA和NSE，三者的敏感性差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的意義(P＜0.05);若三者聯(lián)合檢測(cè)肺癌，敏感性可上升至85.0％。
　　 結(jié)論:
　　 (1) CK19-2G2作為一種新型腫瘤標(biāo)志物，其在患者血清中的水平同腫瘤的病理類型、臨床