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1、目的:建立準(zhǔn)確度高、靈敏度高的液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜法(UPLC-MS/MS法)測(cè)量正常大鼠及四氧嘧啶誘導(dǎo)糖尿病大鼠血漿和代謝物中芒果苷的含量,進(jìn)行動(dòng)力學(xué)分析。
方法:用乙酸乙酯液液萃取法對(duì)生物樣品進(jìn)行預(yù)處理,液相梯度洗脫使用C18柱(50×2.1mm,3μm),流動(dòng)相為甲醇-水(0.20%甲酸),流速為0.35mL/min。檢測(cè)使用ESI源,采用正離子SRM工作模式。
結(jié)果:本實(shí)驗(yàn)得到芒果苷在血漿中的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性
2、范圍為10.156~1300.000ng/mL,標(biāo)準(zhǔn)曲線:Y=-0.0606476+0.0186869X(r=0.9998),平均回收率為75.88~83.07%,日內(nèi)和日間精密度RSD低于12.80%,準(zhǔn)確度為89.58~114.30%。芒果苷在尿液中的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍為10.156~1300.000ng/mL,標(biāo)準(zhǔn)曲線:Y=-0.1230104+0.0151932X(r=0.9997),平均回收率為74.34~89.77%,日內(nèi)和日
3、間精密度RSD低于13.60%,準(zhǔn)確度為95.68~101.93%。芒果苷在糞便中的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍為20.312~2600.000ng/mg,標(biāo)準(zhǔn)曲線:Y=-0.2760112+0.0193592X(r=0.9998),平均回收率為70.31~82.18%,日內(nèi)和日間精密度RSD低于13.20%,準(zhǔn)確度為97.10~105.23%。芒果苷在四氧嘧啶誘導(dǎo)糖尿病大鼠體內(nèi)的血藥峰濃度Cmax和藥時(shí)曲線下面積AUC0-24明顯低于正常大鼠,口
4、服和尾靜脈注射芒果苷后芒果苷在四氧嘧啶誘導(dǎo)糖尿病大鼠尿液中的排泄量低于正常鼠,在糞便中高于正常鼠。
結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)UPLC-MS/MS法來(lái)檢測(cè)大鼠生物樣品中芒果苷的含量,芒果苷在血漿和尿液中的線性范圍均為10.156~1300.000ng/mL,在糞便中的線性范圍為20.312~2600.000ng/mg,均線性良好,日間精密度和日內(nèi)精密度RSD均小于15.00%,準(zhǔn)確度在85.00%~115.00%,平均回收率為70.31
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