核轉錄因子NAC1在腫瘤發(fā)生和發(fā)展中的作用和機制研究-對自噬和細胞衰老的調控作用.pdf

1、目的:
　　 研究核轉錄因子NAC1(伏隔核1，Nucleus accumbens-1)對腫瘤細胞治療敏感性的調控機制，以及對腫瘤形成和惡性進展的影響。
　　 方法:
　　 采用細胞生物學、分子生物學、藥理學和動物實驗學等多種方法檢測:
　　 1) NAC1對細胞自噬的調控作用以及NAC1介導的自噬對臨床化療藥物順鉑敏感性的影響;
　　 2）NAC1對細胞衰老的調控作用以及NAC1介導的細胞衰老逃

2、逸對腫瘤細胞增殖，以及細胞惡性轉化和致瘤性的影響。
　　 結果:
　　 本研究發(fā)現:
　　 1）NAC1是一個全新的自噬調節(jié)因子。在順鉑治療下，NAC1可引起自噬相關蛋白LC3Ⅱ(microtubule-associated protein1 light chain 3)水平上調、p62蛋白（它可參與自噬途徑降解）水平下調、GFP-LC3熒光顆粒數以及細胞自噬小體增加。抑制NAC1介導的自噬激活可增強腫瘤細胞對順

3、鉑的敏感性，表現為細胞活力減弱、凋亡細胞數增加，以及凋亡相關蛋白—剪切的Caspase 3和PARP水平上調。本研究揭示，NAC1介導的自噬激活是通過調控高遷移率族蛋白HMGB1的表達、易位和釋放而實現的。NAC1可促進順鉑治療產生的HMGB1從胞核到胞漿的易位以及HMGB1從胞漿向胞外的釋放。在順鉑治療下，沉默HMGB1的表達則可明顯抑制NAC1介導的自噬激活。
　　 2)NAC1亦是一個全新的細胞衰老抑制因子。NAC1可逃逸

4、輻射和致癌因子誘導的細胞衰老發(fā)生，其表現為SA-β-gal陽性細胞數減少、細胞增殖能力和細胞克隆形成數增加、細胞周期蛋白依賴激酶抑制蛋白-p21表達下調。RT-PCR和熒光素酶報告基因檢測結果顯示，NAC1通過調控ΔNp63（DeltaNp63為p63蛋白的主要表達形式）轉錄來逃逸輻射和致癌因子誘導的細胞衰老，促進腫瘤細胞的增殖，從而有利于致癌因子Ras誘導的MEF細胞的惡性轉化，并在動物模型中促發(fā)腫瘤的形成。
　　 結論: